β受體阻滯劑誘導(dǎo)增殖期血管瘤凋亡的研究.pdf

1、研究一血管瘤病理分期的年齡分布及普萘洛爾的療效觀察
　　目的:通過(guò)比對(duì)血管瘤各期病理結(jié)構(gòu)與年齡分布的差異，以及普萘洛爾對(duì)血管瘤的療效觀察。探討血管瘤病理分期與年齡分布的關(guān)系，評(píng)價(jià)口服普萘洛爾對(duì)血管瘤的治療效果。
　　方法:
　　1.收集天津市兒童醫(yī)院外科2009年1月至2011年1月手術(shù)切除的血管瘤組織蠟塊80例。予組織行HE染色，按染色結(jié)果分析血管瘤病理分期與患兒年齡分布的關(guān)系。
　　2.收集天津市兒童醫(yī)院整形

2、外科2010年1月至2013年1月收治的嬰兒血管瘤121例，其中男48例，女73例?；仡櫺苑治隹诜蛰谅鍫枌?duì)血管瘤的治療效果。
　　結(jié)果:
　　1.HE染色結(jié)果可見(jiàn):血管瘤增殖期主要分布于（0～1歲）患兒，消退期主要分布（1～5歲）患兒，消退完成期主要分布于（5～11歲）患兒。(P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義)。
　　2.療效觀察:所有患兒服藥后48小時(shí)以?xún)?nèi)均可見(jiàn)瘤體不同程度減小，張力下降，顏色變淺，服藥1周之內(nèi)變化較

3、為顯著。隨訪3-5個(gè)月療效評(píng)定:Ⅳ級(jí)主要為（0～1歲）患兒，Ⅲ級(jí)主要為（1～2歲）患兒，Ⅱ級(jí)主要為（2～3歲）患兒，Ⅰ級(jí)主要為（3～5歲）患兒。（P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義）。
　　結(jié)論:
　　1.血管瘤增殖期處于0～1歲，隨后進(jìn)入消退期及消退完成期。
　　2.普萘洛爾對(duì)增殖期血管瘤療效顯著，對(duì)非增殖期血管瘤療效不佳。
　　3.普萘洛爾對(duì)增殖期細(xì)胞有抑制作用，然而其作用機(jī)制目前尚不清楚。
　　4.普萘洛

4、爾為β受體阻滯劑，其對(duì)增殖期細(xì)胞的抑制作用是通過(guò)β1受體還是β2受體，亦或是兩種β受體同時(shí)受抑制有待進(jìn)一步的研究。
　　研究二β受體阻滯劑對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響
　　目的:通過(guò)比對(duì)三種β受體阻滯劑:選擇性β1受體阻滯劑美托洛爾、廣譜β受體阻滯劑普萘洛爾、選擇性β2受體阻滯劑丁氧胺分別對(duì)增殖期HUVEC的作用差異，探索β受體阻滯劑是通過(guò)阻滯β1受體還是β2受體，抑或是二者同時(shí)，抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖。
　　方法:

5、>　　1.培養(yǎng)、鑒定人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞
　　2.采用MTT法檢測(cè)濃度為20μg/ml的三種β受體阻滯劑:美托洛爾、普萘洛爾、丁氧胺對(duì)HUVEC細(xì)胞株增殖的影響。比對(duì)三種藥物組間細(xì)胞活性抑制率的差異。
　　3.采用ELISA法檢測(cè)濃度為20μg/ml三種β受體阻滯劑:美托洛爾、普萘洛爾、丁氧胺對(duì)HUVEC細(xì)胞株VEGF、MMP-9濃度的影響。比較VEGF、MMP-9的濃度在三組間的差異。
　　結(jié)果:
　　1.經(jīng)鑒

6、定所培養(yǎng)的細(xì)胞為HUVEC。
　　2.MMT結(jié)果顯示:HUVEC經(jīng)三種β受體阻滯劑美托洛爾、普萘洛爾、丁氧胺作用24后，均可抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖，美托洛爾組細(xì)胞活性抑制率為20.06％±0.051，普萘洛爾組細(xì)胞活性抑制率為48.07％±0.029，丁氧胺組細(xì)胞活性抑制率為35.69％±0.046。三種藥物組間比較，普萘洛爾組細(xì)胞抑制率較丁氧胺組增加;丁氧胺組細(xì)胞抑制率較美托洛爾組增加。(P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義)。

7、r>　　3.ELISA結(jié)果顯示:HUVEC經(jīng)正常培養(yǎng)基和三種β受體阻滯劑美托洛爾、普萘洛爾、丁氧胺作用24小時(shí)后，VEGF在對(duì)照組濃度為58.073±3.351 pg/ml，美托洛爾組為54.291±1.082pg/ml，普萘洛爾組濃度為49.448±1.041pg/ml，丁氧胺組濃度為51.916±1.626pg/ml。MMP-9在對(duì)照組濃度為0.253±0.026ng/ml，美托洛爾組為0.129±0.022ng/ml，普萘洛爾組濃

8、度為0.026±0.016ng/ml，丁氧胺組濃度為0.054±0.009ng/ml。與對(duì)照組相比較，三種藥物組的VEGF、MMP-9濃度均下降。其中，普萘洛爾組較丁氧胺組的VEGF、MMP-9濃度下降明顯，丁氧胺組較美托洛爾組下降明顯。（P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異）。
　　結(jié)論:
　　1.三種β受體阻滯劑美托洛爾、普萘洛爾、丁氧胺均可以抑制臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖。
　　2.三種β受體阻滯劑美托洛爾、普萘洛爾、

9、丁氧胺均可以降低臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞VEGF、MMP-9的濃度。
　　3.β受體阻滯劑對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖抑制作用由β1、β2受體共同起作用，且β2受體的作用比β1受體更強(qiáng)。
　　研究三β受體阻滯劑誘導(dǎo)HUVEC凋亡的研究
　　目的:通過(guò)比對(duì)三種β受體阻滯劑:選擇性β1受體阻滯劑美托洛爾、廣譜β受體阻滯劑普萘洛爾、選擇性β2受體阻滯劑丁氧胺分別對(duì)增殖期HUVEC早期凋亡率的作用差異，探索β受體阻滯劑是通過(guò)阻滯β1受體還是

10、β2受體，抑或是二者同時(shí)，誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡。旨在初步探討β受體阻滯劑治療血管瘤的作用機(jī)制。
　　方法:
　　1.傳代培養(yǎng)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞，選擇3-6代對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
　　2.運(yùn)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)濃度為20μg/ml的三種β受體阻滯劑:美托洛爾、普萘洛爾、丁氧胺對(duì)HUVEC細(xì)胞株早期凋亡率的影響。
　　結(jié)果:
　　1.人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)良好，24-48小時(shí)即可傳代一次。
　　2.流

11、式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示:HUVEC經(jīng)正常培養(yǎng)基及三種β受體阻滯劑美托洛爾、普萘洛爾、丁氧胺作用24后，對(duì)照組細(xì)胞凋亡率為9.41％±0.53，美托洛爾組細(xì)胞凋亡率為12.44％±0.24，普萘洛爾組細(xì)胞凋亡率為27.14％±0.56，丁氧胺組細(xì)胞凋亡率為18.82％±0.91。與對(duì)照組相比較，三種藥物組細(xì)胞早期凋亡率均有所增加，萘洛爾組細(xì)胞的凋亡率高于丁氧胺組;丁氧胺組凋亡率高于美托洛爾組。（P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義）。