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文檔簡介
1、[目的]
本研究是通過慢性低氧肺動脈高壓大鼠模型,研究慢性低氧對大鼠肺動脈血管壁腺苷A2B受體(A2BR)的分布、含量和基因表達的影響,以期為臨床應用腺苷或受體激動劑治療肺動脈高壓提供理論依據。
[方法]
1.建立常壓低氧性肺動脈高壓大鼠模型。
2.實驗分組:48只雄性Sprague-Dawley大鼠隨機分成對照組(常氧組)、低氧1天組、低氧3天組、低氧5天組、低氧7天組、低氧10
2、天組、低氧14組、低氧21天組,每組6只。
3.用右心導管法測定平均肺動脈壓(mPAP)。
4.用免疫組織化學方法觀察腺苷A2BR蛋白表達的分布和含量的變化。
5.用熒光原位雜交法檢測肺動脈壁上腺苷A2B受體mRNA(A2BRmRNA)的分布和表達水平。
6.用實時熒光定量PCR方法檢測肺動脈血管壁腺苷A2BR基因表達水平。
[結果]
1.肺動脈平均壓在
3、低氧第五天既明顯增高,較對照組比較有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
2.免疫組化結果顯示,慢性低氧導致腺苷A2BR蛋白在大鼠肺動脈血管壁平滑肌細胞膜和血管內膜中表達增加,隨著低氧時間延長,逐漸增加,低氧5天組以上(含5天組)相對于對照組均有統(tǒng)計學意義(P<0.001),而在常氧組及3天以下組極少表達。
3.熒光原位雜交試驗結果顯示,腺苷A2BRmRNA表達在正常大鼠肺動脈血管壁平滑肌細胞膜和血管內膜中較少表達,
4、低氧導致表達增高,從低氧第3天起開始增加,至低氧第5天時相對于對照組有統(tǒng)計學意義(P<0.001),隨著低氧時間延長,逐漸增加,較對照組比較均有統(tǒng)計學意義(均P<0.001)。
4.實時熒光定量PCR檢測結果顯示:細胞中腺苷A2BR基因表達從低氧第3天開始增加,在低氧第5天后明顯增高(均P<0.001),并隨著低氧時間的延長,表達逐漸升高。
[結論]
1.腺苷A2BRmRNA和蛋白在正常大鼠肺動
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