四維超聲對(duì)晚孕胎鼠大腦皮層神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的生物學(xué)影響.pdf

1、隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，超聲波逐漸應(yīng)用于臨床疾病的診斷及產(chǎn)前診斷，物理學(xué)中，超聲波有熱效應(yīng)和空化效應(yīng)，這些生物學(xué)效應(yīng)是否會(huì)對(duì)機(jī)體產(chǎn)生損害的影響?這一直是人們研究的熱點(diǎn)。經(jīng)過大量動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究和臨床觀察，人們逐漸認(rèn)識(shí)到診斷超聲的輻照劑量存在著時(shí)間和強(qiáng)度的關(guān)系，即大劑量和高強(qiáng)度超聲可以瞬間對(duì)機(jī)體產(chǎn)生損害，長(zhǎng)時(shí)間和低強(qiáng)度超聲輻照也會(huì)對(duì)機(jī)體產(chǎn)生不良的后果。尤其是產(chǎn)科超聲檢查，因?yàn)樵谌焉镌缙冢灰獛讉€(gè)胚胎細(xì)胞受損，就會(huì)產(chǎn)生不嚴(yán)重的不良后果，如發(fā)育畸形等

2、。因此，有許多學(xué)者對(duì)超聲的生物學(xué)損害進(jìn)行了大量的研究。隨著計(jì)算機(jī)技術(shù)的不斷更新，超聲儀器及其檢查手段也在不斷的更新，最早使用的是二維超聲（即黑白超聲），隨后又陸續(xù)發(fā)明了頻譜多普勒超聲和彩色多普勒超聲。許多學(xué)者對(duì)這幾種超聲檢查技術(shù)已經(jīng)有了大量的研究成果，并得出了相應(yīng)的結(jié)論。最近，三維超聲和四維超聲（即實(shí)時(shí)三維超聲）已經(jīng)廣泛的應(yīng)用于臨床，其總的超聲輻照時(shí)間及輻照量都相應(yīng)的增加，為產(chǎn)科檢查的安全性帶來(lái)了潛在的危險(xiǎn)，目前，對(duì)這兩種超聲檢查技術(shù)的

3、安全性研究相對(duì)較少，對(duì)其所產(chǎn)生的生物學(xué)效應(yīng)及危害的研究是一項(xiàng)迫在眉睫的任務(wù)。本研究分包括兩個(gè)部分，第一部分是利用光學(xué)顯微鏡觀察受孕小鼠接受四維超聲不同時(shí)段輻照后對(duì)胎鼠大腦皮層細(xì)胞的生物學(xué)影響，主要觀察皮層細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變。第二部分是利用免疫組織化學(xué)技術(shù)測(cè)定神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特異性蛋白即AQP4、S-100、GFAP蛋白的表達(dá)情況，來(lái)確定四維超聲輻照后小鼠大腦神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的生物學(xué)影響。
　　 第一部分四維超聲輻照對(duì)晚孕胎鼠大腦皮層細(xì)胞形

4、態(tài)學(xué)的影響
　　 目的：探討四維超聲不同輻照時(shí)段對(duì)晚孕胎鼠大腦皮層細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變。
　　 方法：將30只懷孕小鼠等量隨機(jī)分配到對(duì)照組、假輻照組、輻照5min組、輻照10min組、輻照20min組及輻照30min組。輻照組在小鼠懷孕第16d時(shí)進(jìn)行四維超聲輻照。假輻照組不發(fā)射超聲波，只實(shí)施輻照操作。每組乳鼠在出生后第10d采取灌流固定，取大腦標(biāo)本，行HE染色后，進(jìn)行光鏡觀察。
　　 結(jié)果：光鏡結(jié)果：對(duì)照組、假輻照組、

5、輻照5min組光鏡觀察未見明顯異常，輻照10min組、輻照20min組及30min組，皮層細(xì)胞排列紊亂，腫脹，出現(xiàn)空泡，部分細(xì)胞壞死。
　　 結(jié)論：四維超聲輻照超過10min可引起大腦皮層細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變。
　　 第二部分四維超聲輻照后應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)觀察小鼠大腦皮層神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特異性蛋白的表達(dá)情況
　　 目的：探討四維超聲輻照后小鼠大腦皮層神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特異性蛋白的表達(dá)情況及其意義。
　　 方法：30只

6、孕鼠等量隨機(jī)分配到對(duì)照組、假輻照30min組、輻照5min、輻照10min、輻照20min及輻照30min組。輻照組在小鼠懷孕第16d時(shí)行四維超聲輻照，假輻照組不發(fā)射超聲波，只實(shí)施輻照操作。每組小鼠出生后第10d進(jìn)行灌流固定，取大腦標(biāo)本，免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特異性蛋白AQP4、S-100、GFAP的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：免疫組織化學(xué)染色后應(yīng)用數(shù)碼圖像分析系統(tǒng)計(jì)算平均面密度值：AQP4陽(yáng)性細(xì)胞平均面密度值隨著輻照時(shí)間

7、的延長(zhǎng)而逐漸減少，GFAP、S-100陽(yáng)性平均面密度值隨著輻照時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸增加。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：三種蛋白對(duì)照組與假輻照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其對(duì)照組與各輻照組比較、假輻照組與各輻照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，S-100、GFAP蛋白20min組與30min輻照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，余各不同時(shí)間段輻照組之間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論：四維超聲輻照可引起小鼠大腦皮層神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特異性蛋白異常表達(dá)，AQP4蛋白表達(dá)減少，GF