SQSTM1-p62在肝癌缺氧、營養(yǎng)缺乏微環(huán)境中的作用及機制研究.pdf_第1頁
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1、復旦大學博士學位論文SQSTM1p62在肝癌缺氧、營養(yǎng)缺乏微環(huán)境中的作用及機制研究姓名：顧澄宇申請學位級別：博士專業(yè)：外科學指導教師：樊嘉201204復旦大學博士學位論文中文摘要第一部分SQSTMl／p62在人肝癌細胞系和肝癌組織中的表達情況研究本部分旨在研究p62在人正常肝細胞系、肝癌細胞系和肝癌組織的表達情況，初步探討p62與自噬相關基因At95和Beclinl之間的關系。選用正常肝細胞系L02和常見的肝癌細胞系Hep3B、HepG

2、2、Huh7、SMMC7721、MHCC97L、MHCC97一H和HCCLM3共7種不同的人肝癌細胞系，通過RealtimePCR、Westernblot方法檢測上述細胞系中p62、At95和Beclin1的mRNA和蛋白表達情況；采用免疫熒光方法，觀察Huh7、SMMC7721、MHCC97H和HCCLM3四個細胞系中p62蛋白的表達分布情況。應用免疫組化方法觀察p62在人肝癌組織及癌旁組織中的表達情況，在腫瘤和癌旁組織(距離腫瘤2c

3、m)的配對樣品中檢測p62、At95和Beclinl的mRNA表達水平，進行統(tǒng)計學分析。通過構建穩(wěn)定敲減Beclin1的SMMC7721和MHCC97H細胞株，觀察在基礎自噬水平抑制的情況下p62蛋白的表達變化。結果發(fā)現(xiàn)，p62mRNA和蛋白在各肝癌細胞系中均有表達，與L02比較具有顯著性差異(P2cm)中的表達水平。研究表明，在基礎自噬水平較高的細胞系中p62的表達水平普遍較低，而基礎自噬水平較低的細胞系中p62高水平表達。抑制自噬，

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