煤工塵肺患者肺巨噬細(xì)胞自噬活動(dòng)研究.pdf

1、目的：研究接塵觀察對(duì)象、壹期、貳期、叁期煤工塵肺患者肺巨噬細(xì)胞中自噬活動(dòng)的變化情況，探討自噬活動(dòng)與煤礦粉塵所致肺部纖維化病變之間關(guān)系，并闡述其可能的調(diào)節(jié)機(jī)制。
　　方法：選取在中國煤礦工人北戴河療養(yǎng)院進(jìn)行大容量全肺灌洗，經(jīng)塵肺診斷專家組確診患有煤工塵肺的患者116例，并排除患有肺部相關(guān)的疾?。ㄈ绶窝?，肺癌，活動(dòng)性肺結(jié)核等），塵肺伴發(fā)肺部并發(fā)癥及患有嚴(yán)重心肺疾病及傳染病的煤工塵肺患者為研究對(duì)象。收集其肺灌洗液，經(jīng)純化后得到肺巨噬細(xì)胞

2、，用透射電子顯微鏡觀察其自噬相關(guān)結(jié)構(gòu)的形態(tài)，包括自噬前體、自噬體、溶酶體和自噬溶酶體。采用蛋白免疫印跡方法檢測自噬標(biāo)志性蛋白 LC3及自噬調(diào)控蛋白 beclin1、mTOR和p-mTOR的表達(dá)量，分析接塵觀察對(duì)象、壹期、貳期、叁期煤工塵肺患者肺巨噬細(xì)胞自噬活動(dòng)的強(qiáng)弱變化。根據(jù)研究對(duì)象接塵量的不同分組，分析接塵量對(duì)肺巨噬細(xì)胞自噬活動(dòng)的影響。根據(jù)研究對(duì)象是否脫塵，將研究對(duì)象分為間斷接塵組和持續(xù)接塵組，分析脫離粉塵作業(yè)對(duì)肺巨噬細(xì)胞自噬活動(dòng)的影

3、響。根據(jù)脫塵年限的不同分組，分析脫塵時(shí)間長短對(duì)肺巨噬細(xì)胞自噬活動(dòng)的影響。
　　結(jié)果：本研究中，接塵觀察對(duì)象、壹期、貳期、叁期的煤工塵肺患者均為男性、漢族。研究對(duì)象的平均年齡為（47.50±6.53）歲（27~64歲）。工種包括采煤工、開拓工、掘進(jìn)工、運(yùn)輸工、維修工等。叁期煤工塵肺患者的平均接塵年限比接塵觀察對(duì)象和壹期煤工塵肺患者長。各期煤工塵肺患者的年齡、吸煙率、脫塵率及脫塵年限比較差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。電鏡觀察發(fā)現(xiàn)不同期別煤工塵肺患

4、者肺巨噬細(xì)胞中自噬活動(dòng)不同，貳期煤工塵肺患者肺巨噬細(xì)胞中自噬體較壹期增多，但叁期煤工塵肺患者中的自噬體較貳期減少。貳期煤工塵肺患者肺巨噬細(xì)胞LC3Ⅱ/Ⅰ和Beclin1表達(dá)量高于壹期，叁期煤工塵肺患者肺巨噬細(xì)胞LC3Ⅱ/Ⅰ和Beclin1表達(dá)量低于貳期，并且叁期煤工塵肺患者肺巨噬細(xì)胞 LC3Ⅱ/Ⅰ表達(dá)量高于壹期，貳期煤工塵肺患者肺巨噬細(xì)胞 Beclin1表達(dá)量高于接塵觀察對(duì)象。貳期煤工塵肺患者肺巨噬細(xì)胞mTOR和p-mTOR表達(dá)量低于接

5、塵觀察對(duì)象和壹期，叁期煤工塵肺患者肺巨噬細(xì)胞 mTOR和p-mTOR表達(dá)量高于貳期。接塵31~40年的煤工塵肺患者肺泡巨噬細(xì)胞中 LC3Ⅱ/Ⅰ的表達(dá)量低于接塵21~30年的煤工塵肺患者，接塵31~40年的煤工塵肺患者肺泡巨噬細(xì)胞中 Beclin1的表達(dá)量低于接塵0~10年的煤工塵肺患者，接塵31~40年的煤工塵肺患者肺泡巨噬細(xì)胞中 mTOR和p-mTOR的表達(dá)量高于接塵21~30年的煤工塵肺患者。比較間斷接塵與持續(xù)接塵組自噬相關(guān)蛋白的表

6、達(dá)量，結(jié)果顯示間斷接塵組 LC3Ⅱ/Ⅰ表達(dá)量較持續(xù)接塵組高，間斷接塵組 mTOR和p-mTOR的表達(dá)量較持續(xù)接塵組低。脫塵1~10年的煤工塵肺患者肺泡巨噬細(xì)胞中LC3Ⅱ/Ⅰ和Beclin1的表達(dá)量低于脫塵11~20年的煤工塵肺患者。脫塵1~10年的煤工塵肺患者肺泡巨噬細(xì)胞中 mTOR和p-mTOR的表達(dá)量高于脫塵11~20年的煤工塵肺患者。
　　結(jié)論：自噬活動(dòng)減弱可能是影響塵肺肺纖維化進(jìn)展的原因之一。接塵時(shí)間過長會(huì)導(dǎo)致肺巨噬細(xì)胞自