大豆異黃酮對腎輻射損傷誘發(fā)腎性骨病的防治作用與機制研究.pdf

1、目的:腹部腫瘤放療可導致腎臟損傷，繼而并發(fā)腎性骨病，嚴重影響患者生存質量，目前尚缺乏確切有效的治療方法。本研究擬通過腎臟局部照射建立腎輻射損傷誘發(fā)腎性骨病動物模型，觀察大豆異黃酮對腎輻射損傷及其誘發(fā)腎性骨病的防治作用及作用機制，為腎輻射損傷誘發(fā)腎性骨病的防治提供實驗依據。 方法:對手術暴露大鼠雙側腎臟應用15Gy <'137>Cs-γ射線進行單次局部照射，建立腎輻射損傷及其誘發(fā)腎性骨病動物模型。照射前7天開始連續(xù)給予大豆異黃酮，

2、于照射后不同時間段觀察其對外周血白細胞數、血脂、組織抗氧化功能、腎組織病理形態(tài)和腎功能改變的影響作用。連續(xù)給藥3個月后，測定腰椎和股骨骨密度、骨生物力學性能和骨代謝生化指標改變，光鏡及電鏡觀察骨組織病理改變并進行形態(tài)計量學分析。應用RT-PCR法檢測腎臟1α羥化酶、24羥化酶mRNA表達及骨組織OPG、RANKL表達改變，探討大豆異黃酮對大鼠腎輻射損傷及其誘發(fā)骨損傷的防治作用及作用機制。同時，應用原代培養(yǎng)成骨細胞和破骨細胞方法，體外觀察

3、異黃酮單體對細胞形態(tài)功能的影響和作用機制。 結果: (1)15Gy <'137>Cs-γ射線腎臟局部照射后大鼠外周血白細胞顯著降低，肝臟和腎臟組織SOD、MDA降低，GSH-Px升高。大豆異黃酮可以明顯減輕腎臟局部照射引起的大鼠造血及抗氧化功能的損傷。 (2)腎臟局部受照大鼠腎組織出現明顯的病理改變和腎功能的損傷，腎1α羥化酶mRNA基因表達量下降。大豆異黃酮可以改善輻射引起的氮質血癥，降低腎輻射損傷大鼠的尿β<,2>-

4、微球蛋白含量，并緩解腎輻射損傷大鼠的高膽固醇血癥和高LDL血癥；同時，對腎臟病理學改變有較好保護作用，可減輕射線對。腎小管上皮細胞線粒體的損傷，維持大鼠腎1α羥化酶和24羥化酶基因的表達。 (3)大豆異黃酮對腎輻射損傷誘發(fā)腎性骨病有較好防治作用。能顯著提其骨量(腰椎BMD和腰椎股骨干灰重)和生物力學性能(腰椎和股骨最大載荷)，改善骨小梁形態(tài)結構(骨小梁面積、數目、厚度和分離度)，降低骨轉換速度(礦化沉積率)；同時，能降低其血AL

5、P和尿Pyd/Cr，維持血1，25(OH)<,2>D<,3>水平，下調骨組織中RANKL/OPG比值。 (4)三羥異黃酮和二羥異黃酮能促進體外培養(yǎng)成骨細胞的增殖、ALP活性和礦化功能，上調成骨細胞OPG mRNA基因表達量和下調RANKL mRNA基因表達量，降低RANKL/OPG比值；同時，可降低體外培養(yǎng)TRAP陽性破骨細胞數目，減少骨吸收陷窩形成。 結論: (1)大豆異黃酮可緩解腎臟局部照射導致的抗氧化功能低下，降低

6、血脂并改善腎組織病理損傷和腎功能障礙； (2)大豆異黃酮對體外培養(yǎng)成骨細胞的增殖率、ALP活性和礦化功能有明顯促進作用，對體外培養(yǎng)破骨細胞的TRAP陽性細胞數和骨吸收陷窩形成有較好抑制作用： (3)異黃酮護骨作用的分子機制與上調OPG mRNA基因表達量和下調RANKL mRNA基因表達量，降低RANKL/OPG比值有關。 (4)大豆異黃酮對腎輻射骨損傷有明顯改善作用，表現在提高骨量和骨生物力學性能、改善骨結構