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1、目的:探討YC-1(3-(5’-羥甲基-2’-呋喃基)-1-苯甲基吲唑)對(duì)乏氧人肺腺癌A549細(xì)胞的放射增敏作用。
方法:以人肺腺癌A549細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,以CoCl2構(gòu)造乏氧模型。①噻唑藍(lán)比色法(MTT法)檢測(cè)不同濃度的YC-1在不同的孵育時(shí)間對(duì)細(xì)胞增殖活性的影響,以及YC-1在常氧與乏氧下對(duì)細(xì)胞作用24h的20%藥物抑制濃度(IC20)。②A549細(xì)胞分為常氧對(duì)照組(PBS組)、乏氧對(duì)照組(150umol/1CoCl2)、
2、乏氧+YC-1組(150umol/1CoCl2+50umol/1YC-1),繼續(xù)培養(yǎng)24h后,行不同劑量的X線照射(0、2、4、6、8GY),克隆形成實(shí)驗(yàn)計(jì)算細(xì)胞存活分?jǐn)?shù),多靶單擊模型擬合細(xì)胞存活曲線并計(jì)算放射增敏比。③A549細(xì)胞分為常氧組和對(duì)照組,每組又分為4個(gè)亞組:對(duì)照組、單照組、YC-1組和聯(lián)合組(YC-1+照射),繼續(xù)培養(yǎng)24h后,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡。④A549細(xì)胞分為常氧組和對(duì)照組,每組又分為3個(gè)亞組:對(duì)照組、單照組和聯(lián)
3、合組(YC-1+照射),繼續(xù)培養(yǎng)24h后,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期分布。
結(jié)果:①YC-1對(duì)A549細(xì)胞有增殖抑制作用,在一定濃度范圍內(nèi)呈時(shí)間-劑量依賴(lài)性,在常氧和乏氧培養(yǎng)24h下IC20分別為18.67μmol/L和39.45μmol/L。②乏氧對(duì)照組和乏氧+YC-1組D0和Dq值分別為(2.1997、1.7960)和(1.9885、1.4239)。三組的SF2分別為0.5291、0.7564和0.6136。聯(lián)合組的SERD0
4、=1.106,SERDq=1.261。③常氧下,四組的凋亡率分別為(2.55±0.14)%,(24.44±0.62)%,(2.31±0.12)%和(24.7±1.3)%;單照組與聯(lián)合組間無(wú)差異(P=0.674)。乏氧下,四組的凋亡率分別為(2.95±0.37)%,(15.44±0.96)%,(3.09±0.32)%和(30.17±1.22)%,單照組與聯(lián)合組間的凋亡率有差異(P=0.000)。④常氧培養(yǎng)下,各組間的G2/M期細(xì)胞比例不同
5、(F=31.33,P=0.001),單照組與聯(lián)合組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.39)。但是在乏氧下,單照組與聯(lián)合組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.000)。
結(jié)論:YC-1對(duì)A549細(xì)胞有增殖抑制作用,在一定濃度范圍內(nèi)呈時(shí)間-劑量依賴(lài)性。YC-1對(duì)乏氧的A549細(xì)胞有放射增敏作用。常氧培養(yǎng)下,YC-1聯(lián)合放射無(wú)促細(xì)胞凋亡作用,并不能使細(xì)胞周期發(fā)生G2/M期阻滯,無(wú)放射增敏作用。乏氧培養(yǎng)下,YC-1聯(lián)合放射對(duì)A549細(xì)胞有促凋亡作用并使其發(fā)
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