草魚T細胞表面分子CD4L和CD8α-β的cDNA克隆及其免疫學特性研究.pdf

1、在哺乳動物中，T淋巴細胞表面分子標記CD4和CD8將T細胞分為輔助性T細胞和細胞毒性T細胞兩種主要亞群。具體地，CD4和CD8分子分別通過與自身MHCⅠ類分子和Ⅱ類分子的恒定區(qū)結(jié)合，加強T細胞與APC或靶細胞的相互作用以及TCR-CD3信號的轉(zhuǎn)導。為獲悉它們在魚類的分子結(jié)構(gòu)和可能的功能信息，本課題克隆了草魚CD4L、CD8α和CD8β基因，得到了它們的全長cDNA序列。預測的蛋白質(zhì)擁有和哺乳動物以及其它魚類相似的結(jié)構(gòu)，例如都含有免疫球蛋

2、白超家族成員。通過半定量PCR我們檢測到CD4L、CD8α和CD8β基因在草魚胸腺中有最高表達量，其次在鰓、頭腎、腎和小腸等其它免疫相關組織中有高表達。為進一步明確CD4L、CD8α和CD8β的免疫學功能，本課題以草魚外周血淋巴細胞（PBLs）為模型，發(fā)現(xiàn)PHA明顯上調(diào)T細胞的表面分子標記CD4L、CD8α和CD8β的mRNA水平的表達，然而LPS無此作用。這一結(jié)果驗證了PHA和LPS分別特異作用于魚類T和B淋巴細胞的性質(zhì)。
　　

3、NF-κB信號通路對于哺乳動物T細胞的功能至關重要，而且不同的NF-κB家族成員在T細胞中發(fā)揮不同的作用，因此研究NF-κB信號通路十分必要。本課題克隆了草魚NF-κB信號通路中的抑制蛋白IκBα，進一步在草魚PBLs中，發(fā)現(xiàn)LPS從3 h開始刺激IκBα的表達，12 h后達到頂峰然后衰減，這和哺乳動物中的IκBα的自調(diào)控作用方式是一致的。而PHA從1 h開始呈現(xiàn)持續(xù)上調(diào)IκBα的表達。結(jié)果還顯示NF-κB的抑制劑可以抑制LPS和PHA