重建前交叉韌帶后本體感受器變化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：前交叉韌帶（ACL）損傷的評(píng)估與功能重建是骨科、運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)以及康復(fù)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中最重要的課題之一。盡管ACL斷裂經(jīng)韌帶重建后，可以恢復(fù)膝關(guān)節(jié)的機(jī)械完整性，但其本體感覺(jué)仍不能恢復(fù)到損傷前的水平，因而對(duì)ACL損傷的本體感覺(jué)的重建具有重要的意義。但國(guó)內(nèi)尚缺少ACL斷裂重建后的本體感受器形態(tài)學(xué)方面的研究，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察兔自體髕腱重建前交叉韌帶后，移植物本體感受器的形態(tài)學(xué)及數(shù)量的改變，探討膝關(guān)節(jié)本體感覺(jué)恢復(fù)過(guò)程中的神經(jīng)組織學(xué)變化，并為其在臨床上的

2、康復(fù)治療提供理論依據(jù)。
　　 方法：選取15只成年新西蘭大白兔，隨機(jī)選擇實(shí)驗(yàn)兔一側(cè)膝關(guān)節(jié)行自體髕腱前交叉韌帶重建手術(shù)，為實(shí)驗(yàn)組，另一側(cè)為對(duì)照組。兔仰臥位固定于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，麻醉滿意后，消毒、鋪無(wú)菌巾。在實(shí)驗(yàn)兔后腿做一長(zhǎng)約3cm的膝前內(nèi)側(cè)弧形切口，暴露髕腱，切取內(nèi)側(cè)半髕腱，長(zhǎng)約3cm，寬約2mm，用3-0滌綸編織線將髕腱兩端編織縫合，備用。然后將髕骨向外側(cè)方脫位，充分暴露前交叉韌帶并完全切除。屈膝90°位，在前交叉韌帶兩端止點(diǎn)處的股骨

3、和脛骨上分別鉆直徑2.4mm的骨隧道，將肌腱一端拉過(guò)脛骨和股骨骨隧道，移入關(guān)節(jié)腔，調(diào)整髕腱位置，使位于膝關(guān)節(jié)中央。于骨隧道外口取適當(dāng)部位分別釘入門形釘，將肌腱兩端拉緊，分別用縫線綁扎固定。生理鹽水沖洗，用一號(hào)絲線逐層縫合關(guān)節(jié)囊、皮下組織、皮膚，并用無(wú)菌紗布包扎。術(shù)后不進(jìn)行膝關(guān)節(jié)的固定，讓其自由活動(dòng)。每天肌注青霉素20萬(wàn)U/d，持續(xù)7d，并進(jìn)行大體情況觀察。分別于術(shù)后3周，6周和12周末耳緣靜脈空氣栓塞各處死5只實(shí)驗(yàn)兔，取膝關(guān)節(jié)標(biāo)本，然后

4、從上、下止點(diǎn)處切取重建物標(biāo)本，對(duì)照組切取對(duì)側(cè)內(nèi)側(cè)半髕腱，取材方法同上，用緩沖甲醛溶液固定，分別進(jìn)行組織學(xué)和免疫組織化學(xué)觀察及圖像分析對(duì)髕腱組織中的免疫組化染色結(jié)果進(jìn)行計(jì)數(shù)。
　　 結(jié)果：⑴所有實(shí)驗(yàn)兔在術(shù)后2周均呈跛行步態(tài)，到術(shù)后9周時(shí)有2例出現(xiàn)膝關(guān)節(jié)僵硬，屈伸活動(dòng)為0°-35°，這種狀況持續(xù)到實(shí)驗(yàn)結(jié)束。其余實(shí)驗(yàn)兔膝關(guān)節(jié)被動(dòng)活動(dòng)度均能達(dá)到正常。術(shù)后重建側(cè)膝關(guān)節(jié)傷口均正常愈合，所有實(shí)驗(yàn)兔術(shù)后均未出現(xiàn)感染。⑵對(duì)照組正常髕腱：正常兔髕腱

5、HE染色均為致密膠原組織。膠原纖維排列整齊，細(xì)胞核均勻，大小、形態(tài)正常，無(wú)膠原纖維增生；實(shí)驗(yàn)組術(shù)后3周主要以組織壞死為主。見(jiàn)成纖維細(xì)胞，排列紊亂，移植物中部可見(jiàn)壞死區(qū)，為無(wú)序的膠原纖維束，細(xì)胞數(shù)量減少；術(shù)后6周實(shí)驗(yàn)組的膠原數(shù)目較多，排列較整齊，移植物內(nèi)細(xì)胞數(shù)量較多，以成纖維細(xì)胞為主，細(xì)胞、纖維排列紊亂。中心部細(xì)胞數(shù)減少，尚可見(jiàn)壞死組織，細(xì)胞核呈圓形，可見(jiàn)細(xì)胞增殖；術(shù)后12周實(shí)驗(yàn)組的膠原數(shù)目較多，細(xì)胞數(shù)量較多，以成纖維細(xì)胞為主，移植物細(xì)胞

6、和纖維總體排列仍顯紊亂。⑶鏡下見(jiàn)Pacini小體、Ruffini小體、形態(tài)學(xué)上未分類的感覺(jué)小體和游離神經(jīng)末梢。Pacini小體呈橢圓形，有多層被囊，似蔥皮狀，厚25-40μm；Ruffini小體鏡下大多顯示為一個(gè)有薄層結(jié)締組織囊的卵圓形小體，大小形狀各異，大的為300-5501μm，有100μm厚外囊；小的為180-300μm，有10-50μm厚外囊；鏡下見(jiàn)游離神經(jīng)末梢常呈無(wú)髓神經(jīng)分支形式出現(xiàn)，且無(wú)包裹。3周、6周、12周其形態(tài)學(xué)未見(jiàn)明

7、顯變化。⑷采用Wilcoxon秩和檢驗(yàn)，術(shù)后3周，6周，12周Ruffini小體中位數(shù)，重建組分別為3，4，6個(gè)，對(duì)照組分別為7，6，10個(gè)，重建組低于對(duì)照組，P值分別為0.014，0.046，0.045；術(shù)后3周，6周，12周Pacini小體中位數(shù)，重建組分別為2，4，4個(gè)，對(duì)照組分別為5，8，8個(gè)，重建組低于對(duì)照組，P值分別為0.013，0.011，0.015；術(shù)后3周，6周游離神經(jīng)末梢中位數(shù)，重建組分別為16，18個(gè)，對(duì)照組分別為

8、25，26個(gè)，重建組低于對(duì)照組，P值分別為0.036，0.045。術(shù)后12周，重建組游離神經(jīng)末梢中位數(shù)為20個(gè)，重建組與對(duì)照組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.344），術(shù)后3周、6周本體感受器總數(shù)量顯著下降并且實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組之間統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著的不同（P<0.05）。術(shù)后12周實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組本體感受器數(shù)量在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無(wú)顯著差別（P>0.05）。
　　 結(jié)論：①髕腱中存在的本體感受器有：Pacini小體、Ruffini小體、形態(tài)學(xué)上未分