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
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1、背景:百草枯(PQ),1,1'-二甲基-4,4'-聯(lián)吡啶二氯陽(yáng)離子鹽,自1962年開(kāi)始作為除草劑生產(chǎn)使用,近30年已成為發(fā)展中國(guó)家應(yīng)用最廣泛的除草劑之一。隨著百草枯的廣泛應(yīng)用,口服自殺或誤服百草枯的病例也在逐年不斷增加。大多數(shù)中毒患者是經(jīng)口服,但PQ經(jīng)皮膚接觸或呼吸道吸入也可造成急性中毒,且中毒后死亡率極高。PQ吸收進(jìn)入血液后幾乎不與血漿蛋白結(jié)合,能迅速分布于肺、肝、腎和肌肉等組織中,但主要蓄積在肺和骨骼肌中,所以中毒后以肺部損傷最為突
2、出,除此之外有學(xué)者認(rèn)為肺部損傷嚴(yán)重可能與肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞多胺類物質(zhì)攝取途徑有關(guān)。中、重度的PQ中毒早期為肺水腫等急性肺損傷表現(xiàn),晚期出現(xiàn)進(jìn)行性肺纖維化。PQ誘導(dǎo)肺組織損傷的機(jī)制尚未完全清楚,目前研究較多的學(xué)說(shuō)包括氧自由基學(xué)說(shuō),脂質(zhì)過(guò)氧化損傷,細(xì)胞因子以及DNA損傷等,但仍沒(méi)有一個(gè)學(xué)說(shuō)能詳細(xì)闡明PQ肺損傷的具體機(jī)制。近年來(lái),隨著細(xì)胞分子學(xué)的發(fā)展,細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)在肺纖維化中的作用越來(lái)越受到人們的重視,隨之的研究亦越來(lái)越多。其中TGF-β1已被
3、公認(rèn)為是纖維化形成和發(fā)展的啟動(dòng)因子,它通過(guò)介導(dǎo)下游的Smad以及ERK信號(hào)通道共同參與了纖維化的形成。目前已有學(xué)者證實(shí)TGF-β1在PQ中毒大鼠模型及中毒患者的肺纖維化形成中均發(fā)揮重要的作用,而TGF-β1是否也同樣通過(guò)Smad信號(hào)通道介導(dǎo)了PQ肺纖維化的形成,關(guān)于此方面的研究報(bào)道甚少。
目的:建立大鼠百草枯中毒急性肺損傷模型,研究TGFβ1-Smad通道在百草枯肺損傷中的作用機(jī)制。
方法:成年雄性Wiste
4、r大鼠共80只,隨機(jī)分為2組,百草枯染毒組給予體積分?jǐn)?shù)20%的百草枯原液按照50mg/kg大鼠體重灌胃;正常對(duì)照組給予等量生理鹽水灌胃。染毒組和對(duì)照組分別于實(shí)驗(yàn)開(kāi)始第7、14、21、28天分批處死動(dòng)物,留取肺組織待檢。ELISA方法測(cè)定肺組織勻漿中TGF-β1水平;用免疫組化分析分別測(cè)定TGF-β1、TBRⅠ(轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子βⅠ型受體)、Smad4、ColⅠ(Ⅰ型膠原)、TIMP1(基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1),MMP2(基質(zhì)金屬蛋白酶-2
5、)在肺組織中的表達(dá);同時(shí)留取部分肺組織做病理切片,行HE和Masson染色后光學(xué)顯微鏡下觀察肺組織病理改變。
結(jié)果:百草枯染毒組肺組織勻漿中的TGF-β1水平以及肺組織中TGF-β1、TBRⅠ、Smad4、ColⅠ表達(dá)在中毒后都呈逐漸增高趨勢(shì),且在中毒第14天達(dá)最高值,較同期對(duì)照組均升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。各實(shí)驗(yàn)天數(shù)染毒組肺組織中MMP-2及TIMP-1的表達(dá)較同期對(duì)照組均升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。MMP-2在中毒第7天達(dá)最
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