基于全自動(dòng)管式化學(xué)發(fā)光技術(shù)的肌鈣蛋白T和肌酸激酶MB同工酶定量檢測試劑的研制.pdf

1、心血管疾病(cardiovascular diseases，CVDs)已成為中國成人首要的死亡原因。而導(dǎo)致心血管疾病死亡率居高不下的一個(gè)主要原因，是對心血管疾病的早期診斷困難。心肌損傷標(biāo)志物以其價(jià)格低廉、適用于動(dòng)態(tài)檢測等特點(diǎn)逐漸成為心臟疾病的實(shí)驗(yàn)室診斷標(biāo)準(zhǔn)。國外的心肌損傷標(biāo)志物試劑價(jià)格昂貴，不利于推廣和應(yīng)用。本研究擬建立心肌損傷標(biāo)志物肌鈣蛋白T(cTnT)和肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)定量檢測試劑（化學(xué)發(fā)光免疫分析方法），以期達(dá)到國

2、際主流試劑的水平，為臨床醫(yī)院提供一種高效低成本的檢測手段。
　　 本研究首先通過基因工程的手段，表達(dá)純化了cTnT重組抗原，并通過單克隆技術(shù)獲得了20株有活性的抗體。對其進(jìn)行進(jìn)一步篩選挑選了2株單抗1E7和7D2分別標(biāo)記吖啶酯和磁珠，研制出了基于全自動(dòng)管式化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)的cTnT定量檢測試劑，并對試劑性能進(jìn)行了初步評估。結(jié)果顯示，該試劑有檢測范圍為0.01 ng/mL～48ng/mL，達(dá)到國際主流試劑水平。采用該試劑與羅氏

3、試劑同時(shí)對93份臨床標(biāo)本進(jìn)行檢測，顯示二者定量相關(guān)性好(R2=0.9677)。37℃加速破壞7天實(shí)驗(yàn)結(jié)果活性均維持90％以上，顯示較好的熱穩(wěn)定性。
　　 此外，本研究基于全自動(dòng)管式化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)，研制出CK-MB定量檢測試劑，并對其性能進(jìn)行初步評估。結(jié)果顯示，該試劑檢測范圍達(dá)到國際主流試劑水平，為0.068ng/mL～1000ng/mL，采用該試劑與雅培試劑同時(shí)對48份臨床標(biāo)本進(jìn)行檢測，顯示二者定量相關(guān)性好(R2=0.95