酪氨酸蛋白激酶Lyn、Tec蛋白相互作用光激化學發(fā)光免疫分析試劑的研制.pdf

1、南方醫(yī)科大學2013級碩士學位論文酪氨酸蛋白激酶Lyn、Tee蛋白相互作用光激化學發(fā)光免疫分析試劑的研制Developmentofdiagnosticreagentsfortyrosine—proteinkinaseLyn，Tecinteractionusingamplifiedluminescentproximityhomogeneousassay課題來源：國家“863”科技計劃項目(2014AA020904)學位申請人導師姓名專業(yè)名

2、稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學院答辯委員會主席答辯委員會委員張佳風羅樹紅教授應用生物學學術型碩士研究生生物技術學院朱家勇教授余新炳教授何慶瑜教授黃杰副研究員鄭磊教授2016年5月30日廣州摘要如今，隨著技術發(fā)展，高通量的生物分子篩選分析對于自動化檢測儀器平臺的要求較迫切，而不需要通過洗滌分離結合標記與游離標記步驟的光激化學發(fā)光免疫分析(AlphaLISA)技術很好地滿足這一需求。光激化學發(fā)光免疫分析(Amplifiedluminescentp

3、roximityhomogeneousassayAlphaLISA)技術是由UllmanEF等在1994年發(fā)明的單線態(tài)氧分子能量傳遞發(fā)光免疫分析(LuminescentoxygenchannelingimmunoassayLOCI)技術發(fā)展而來，美國PerkinElmer公司則陸續(xù)生產(chǎn)推出二十多種AlphaScreen@試劑盒。該技術結合納米材料、激光技術和單線態(tài)氧半衰期短的三大優(yōu)勢，實現(xiàn)均相反應，既克服了EIA技術的穩(wěn)定性差、CLIA

4、技術和ECLIA技術的無法重復測量及成本高等缺點，還由于發(fā)射峰為615nm處避開了血清以及組織中的其他成分的發(fā)射峰，因而在樣本的檢測上較先前的技術更具優(yōu)勢。AlphaLISA技術具有靈敏度高、線性范圍寬、反應時間短、背景信號低，檢測重復性好，無需洗滌，無放射性污染，操作簡便，容易實現(xiàn)自動化和高通量等優(yōu)點，可對現(xiàn)有免疫學檢測產(chǎn)品進行升級換代。目前已有報道該技術用于檢測包括如OX40受體與OX40L配體、雌激素受體(ER)和SteroidR

5、eceptorCoactivatorl(SRC1)、病毒蛋白E6和E6AP等蛋白質(zhì)之間相互作用的檢測。蛋白酪氨酸激酶(ProteinTyrosineKinase，PTK)是一類催化ATP上Y磷酸轉移至蛋白酪氨酸殘基并使多種底物發(fā)生磷酸化的激酶，分為受體型和非受體型酪氨酸蛋白激酶，其均在細胞生長、增殖、分化中具有重要作用。酪氨酸蛋白激酶Lyn(Tyrosine—ProteinKinaseLyn)亦稱JTK8，屬于非受體型酪氨酸蛋白激酶Sr