SDF-1a促黏附作用與上調(diào)CXCR-4的表達(dá)相關(guān).pdf

1、趨化因子SDF—1a及其受體CXCR4在胚胎發(fā)育、腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移及介導(dǎo)免疫缺陷病毒(HIV)感染等方面起著重要作用。最近研究表明SDF—1a在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中高表達(dá)，SDF—1a/CXCR4與動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系已經(jīng)引起重視。 本研究首先探討ox—LDL對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞上SDF—1a表達(dá)的影響，然后用SDF—1a處理的THP—1單核細(xì)胞上對(duì)CXCR4的表達(dá)進(jìn)行研究，最后對(duì)SDF—1a/CXCR4在單核細(xì)胞/血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附的作用進(jìn)行研究

2、。 目的：ox—LDL對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞SD—1a表達(dá)的影響；SDF—1a對(duì)THP—1單核細(xì)胞上CXCR4表達(dá)的影響：SDF—1a和CXCR4抗體干預(yù)對(duì)THP—1單核細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞黏附的影響；以便探討SDF—1a促進(jìn)單核細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞黏附作用的機(jī)制。 方法：RT—PCR檢測(cè)SDF—1a和CXCR4mRNA的表達(dá)，Westernblot檢測(cè)其蛋白表達(dá)變化，觀察ox—LDL對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞上SDF—1a表達(dá)的劑量和時(shí)間效應(yīng)，觀察SDF—1

3、a對(duì)THP—1單核細(xì)胞CXCR4表達(dá)的影響。用靜態(tài)黏附實(shí)驗(yàn)來(lái)研究THP—1與內(nèi)皮細(xì)胞的黏附，用25μg/mlox—LDL或不同濃度SDF—1a處理內(nèi)皮細(xì)胞48h或30min后，將THP—1單核細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞共孵育后洗脫檢測(cè)黏附作用，并加用不同濃度的CXCR4抗體阻斷。 結(jié)果：SDF—1a在正常的血管內(nèi)皮細(xì)胞上幾乎不表達(dá)，ox—LDL可以上調(diào)內(nèi)皮細(xì)胞上SDF—1a表達(dá)，0—125μg/mlox—LDL處理48h，隨ox—LDL濃度

4、增加，SDF—1a的表達(dá)亦逐漸增強(qiáng)，當(dāng)ox—LDL濃度為25μg/ml處理48h，SDF—1a表達(dá)到達(dá)峰值。用25μg/mlox—LDL與內(nèi)皮細(xì)胞孵育0—48h，隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)，SDF—1a表達(dá)逐漸的增強(qiáng)，在48h時(shí)SDF—1a的表達(dá)達(dá)到最大。100ng/mlSDF—1a可以上調(diào)THP—1單核細(xì)胞上CXCR4的表達(dá)。Ox—LDL可以增強(qiáng)THP—1與內(nèi)皮細(xì)胞的黏附，25μg/mlox—LDL處理組THP—1與內(nèi)皮細(xì)胞的黏附細(xì)胞數(shù)最多，