GGT調(diào)節(jié)HIF-1a對膠質(zhì)瘤侵襲作用的研究.pdf

1、目的：研究低氧條件下，蛋白異戊烯轉(zhuǎn)移酶GGT對腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞侵襲和遷移能力的影響及機(jī)制，為膠質(zhì)瘤的基因治療提供理論和實驗依據(jù)。
　　 方法：(1)用氯化鈷(CoCl2)處理細(xì)胞得到化學(xué)性低氧模型，用免疫印跡法(WB)檢測HIF-1α水平以明確低氧模型是否成功；劃痕實驗或Transwell實驗檢測細(xì)胞遷移侵襲能力；明膠酶譜法檢測MMP2活性水平；細(xì)胞貼壁實驗檢測細(xì)胞粘附能力；WB檢測Cadherin水平。(2)WB和免疫熒光

2、法檢測低氧條件下GGT特異性β啞基的水平。(3)低氧條件下，用siRNA下調(diào)GGTβ表達(dá)，或用GGT特異性抑制劑GGTI-2147處理腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞，WB檢測GGTβ和HIF-1α的水平。(4)低氧條件下，下調(diào)GGTβ表達(dá)和GGTI-2147處理后，Transwell實驗檢測腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞的侵襲遷移能力。
　　 結(jié)果：(1)化學(xué)性低氧條件下，腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞侵襲遷移能力降低，粘附能力升高。(2)化學(xué)性低氧條件下，