發(fā)育性髖關節(jié)脫位軟骨組織病理改變與細胞凋亡的動態(tài)實驗研究.pdf

1、目的：動態(tài)觀察發(fā)育性髖關節(jié)脫位（DDH）在髖關節(jié)脫位以及閉合復位髖關節(jié)后，髖臼和股骨頭關節(jié)軟骨細胞凋亡與發(fā)育異常之間的關系，以及與髖關節(jié)脫位持續(xù)時間和干預措施的關聯(lián)性。
　　方法：新西蘭大耳白兔100只，雌雄不限，月齡4W，體重（0.5±0.05）kg，平均0.5 kg，采用兔后肢伸膝屈髖位管型石膏固定方法制作DDH模型。將實驗用動物左后肢管型石膏固定為實驗組，右后肢不做處理為空白對照組。石膏固定術前、術后8W分別攝X線片，根據(jù)髖

2、臼指數(shù)，Shenton線等方法判定是否脫位成功。將固定8W后經(jīng)X線證實存在DDH的大耳白兔隨機分為5組，A組立即處死；B組和C組繼續(xù)固定，分別在2W和4W后處死；D組和E組解除固定并實施閉合復位髖關節(jié)（X線片證實復位成功）后2W和4W處死，均獲取實驗側及對照側髖關節(jié)標本。4℃條件下解剖髖關節(jié)，以4﹪多聚甲醛固定雙側髖臼和股骨頭關節(jié)軟骨標本48h，10%的乙二胺四乙酸二鈉（EDTA-Na2）脫鈣10W，經(jīng)過脫水、石蠟包埋、連續(xù)切片，制作成

3、5μm的標本待檢。動態(tài)觀察雙側髖臼和股骨頭關節(jié)軟骨的病理變化，HE染色觀察細胞病理學變化、電鏡觀察細胞超微結構、TUNEL法檢測細胞凋亡率、免疫組化 S-P法檢測細胞內(nèi) Bcl-2、Caspase-3和Caspase-8的表達情況。
　　結果：DDH髖關節(jié)脫位的實驗側X線顯示髖臼指數(shù)較對照側明顯增大（P＜0.05）。持續(xù)髖關節(jié)脫位組實驗側髖臼和股骨頭關節(jié)軟骨細胞稀疏，排列混亂，細胞凋亡率高于對照側（P＜0.05），細胞凋亡與Bcl

4、-2低表達以及Caspase-3和Caspase-8高表達呈正相關。透視電鏡下細胞染色質邊集，核形不規(guī)整，核膜表面凹凸不平。閉合復位髖關節(jié)組實驗側髖臼和股骨頭關節(jié)軟骨依然排列混亂，大小不均，與對照側相比可見軟骨細胞輕微腫脹。透視電鏡顯示對照側髖臼和股骨頭關節(jié)軟骨細胞排列整齊，細胞結構清晰可見，胞質均勻，胞核呈圓形，核仁居中；實驗側細胞核染色質發(fā)生固縮，細胞質內(nèi)出現(xiàn)許多稱為氣穴現(xiàn)象的空泡結構，細胞器不易辯認。實驗側髖臼和股骨頭關節(jié)軟骨細胞

5、凋亡率高于對照側（P＜0.05），細胞凋亡與 Bcl-2低表達以及 Caspase-3和Caspase-8高表達呈正相關。持續(xù)髖關節(jié)脫位組與閉合復位髖關節(jié)組的實驗側髖臼和股骨頭關節(jié)軟骨細胞凋亡率無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)，Caspase-8表達組間比較存在統(tǒng)計學差異(P＜0.05)，但是，Bcl-2和Caspase-3表達情況組間比較無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。
　　結論：本研究表明，DDH髖關節(jié)脫位后的髖臼和股骨頭關節(jié)軟骨中