楊梅樹皮、楊梅葉和楊梅果體外抗氧化物質(zhì)基礎(chǔ)研究.pdf

1、楊梅(Myrica rubra(Lour.) Sieb.et Zucc.)系楊梅科（Myricaceae）楊梅屬（Myrica）多年生常綠喬木。楊梅樹皮、葉、果具有抗氧化、神經(jīng)細胞保護以及抗腫瘤等多種藥理活性。本論文將探討楊梅樹皮、葉和果發(fā)揮體外抗氧化活性的物質(zhì)基礎(chǔ)。
　　首先采用化學評價和細胞評價分別對楊梅樹皮、葉和果提取物進行體外抗氧化能力評價。化學評估法選擇自由基清除法(DPPH·)和總還原能力測定法(FRAP)，以上實驗得

2、到的抗氧化活性順序為:樹皮＞果＞葉;細胞評價法采用H2O2誘導的PC12細胞氧化應(yīng)激損傷模型，MTT檢測結(jié)果表明:楊梅樹皮提取物在25-50μg/ml、楊梅果提取物濃度≥50μg/ml具有明顯的細胞保護活性，而楊梅葉提取物則無明顯保護作用。流式細胞檢測結(jié)果亦證明:楊梅樹皮和楊梅果提取物均具有明顯的抗細胞凋亡作用，而楊梅葉無明顯抗細胞凋亡作用。相關(guān)氧化應(yīng)激指標檢測表明:楊梅樹皮和楊梅果提取物能夠顯著地抑制H2O2引起的PC12細胞內(nèi)ROS

3、的增多和MDA的形成，并增加H2O2引起PC12細胞內(nèi)SOD的降低?；瘜W和細胞體外抗氧化活性評價均證明楊梅樹皮具有良好的抗氧化作用。
　　為深入了解楊梅樹皮的化學成分，進一步尋找其活性物質(zhì)，采用正相硅膠、Sephadex LH-20和制備液相等多種色譜方法從楊梅樹皮醇提取物中分離得到14個化合物，并通過化合物的理化性質(zhì)和UV、IR、NMR、MS等波譜數(shù)據(jù)進行結(jié)構(gòu)鑒定，其中二苯基庚烷類化合物4個:3，5-二甲氧基-4-羥基楊梅醇，楊

4、梅醇，楊梅酮，Myricanol11-Sulfate;黃酮類化合物3個:楊梅苷，槲皮素，槲皮苷;三萜及甾醇類化合物7個:檉柳醇，熊果醇，熊果酸，蒲公英賽醇，楊梅萜二醇，β-谷甾醇，胡蘿卜苷。其中化合物3，5-二甲氧基-4-羥基楊梅醇為新化合物，化合物檉柳醇、熊果醇為首次從該屬植物中分離得到。
　　對6個主要化合物（楊梅醇、楊梅酮、Myricanol11-Sulfate、楊梅苷、槲皮素、槲皮苷）進行抗氧化應(yīng)激活性篩選，分別采用H2O

5、2和谷氨酸誘導的PC12細胞氧化應(yīng)激損傷模型進行活性篩選，結(jié)果表明3個黃酮類化合物對兩個模型均具有良好的細胞保護活性，以楊梅苷活性最強;而3個二苯基庚烷，只有化合物Myricanol11-Sulfate因11位被磺酸基取代，具有較好的保護活性。流式細胞檢測進一步證明化合物楊梅苷和Myricanol11-Sulfate可部分逆轉(zhuǎn)谷氨酸損傷導致的細胞凋亡;氧化應(yīng)激相關(guān)指標的檢測結(jié)果同樣證明楊梅苷和Myricanol11-Sulfate能夠有

6、效地抑制ROS的增多和MDA的形成同時增加細胞內(nèi)SOD的含量。
　　為了進一步闡明楊梅樹皮、葉和果三個部位抗氧化活性的物質(zhì)基礎(chǔ)，采用UPLC-PDA、UPLC/QTof-MS結(jié)合主成分分析對三者的化學成分進行比較研究，結(jié)果表明樹皮和葉中主要含有黃酮和二苯基庚烷類成分，果中主要含有黃酮和酚酸類成分;主成分分析(principle component analysis，PCA)表明，楊梅樹皮與楊梅葉的化學組成相近，但楊梅果與二者化學成