大鼠經(jīng)膽管灌注化療的藥代動力學(xué)研究.pdf

1、目的: 通過建立大鼠肝內(nèi)膽管癌（ICC）模型和經(jīng)膽管連續(xù)灌注化療模型，運用反相高效液相色譜法（RP-HPLC）測定表阿霉素（Epirubicin，Epi）在大鼠血漿和肝臟組織中的濃度。比較該化療方法與傳統(tǒng)經(jīng)靜脈化療的藥代動力學(xué)區(qū)別，分析經(jīng)膽管灌注化療的藥代動力學(xué)特點。 方法: 以含3-甲基-二甲胺基偶氮苯（3’-Me-DAB）的特殊致癌飼料喂養(yǎng)健康成年SD大鼠50只，以普通飼料喂養(yǎng)組為對照組，在實驗的不同時間段分批處死動物取肝臟

2、組織，觀察其癌變演進過程。通過大鼠肝外膽道留置硬膜外導(dǎo)管、體外轉(zhuǎn)流，經(jīng)該導(dǎo)管向肝臟灌注表阿霉素。于給藥后不同時間點（5min，10min，20min，30min，40min，1h，2h，4h，9h，12h，24h，48h）取大鼠血漿及肝臟組織，經(jīng)蛋白沉淀，有機相萃取，氮氣吹干，流動相復(fù)溶等處理后，運用反相高效液相色譜法（RP-HPLC），熒光檢測表阿霉素的藥物濃度，以經(jīng)靜脈化療組作為對照，繪制時間-藥物濃度變化曲線。觀察兩種給藥方式的藥

3、代動力學(xué)及AUC(Area under curve) 區(qū)別。 結(jié)果: SD大鼠經(jīng)致癌飼料喂養(yǎng)后，組織病理學(xué)觀察到：給藥后肝臟早期主要表現(xiàn)為卵圓細胞增生﹑管樣增生及小膽管囊性增生；中期表現(xiàn)為肝內(nèi)膽管上皮乳頭樣增生﹑不典型增生﹑化生﹑腺體結(jié)構(gòu)形成﹑膽管纖維化；晚期出現(xiàn)肝內(nèi)膽管腺瘤﹑腺癌及癌巢。晚期膽管癌的成癌率達80％。經(jīng)膽管插管、體外轉(zhuǎn)流以及經(jīng)膽管灌注表阿霉素的連續(xù)灌注化療模型的存活率達到80％，主要死亡原因多為導(dǎo)管阻塞，脫落等原

4、因，注意術(shù)中操作可以減少發(fā)生率。大鼠能夠耐受多次經(jīng)膽管灌注一定壓力，一定劑量的表阿霉素。反相高效液相色譜法（RP-HPLC）熒光檢測血漿及肝臟組織中的表阿霉素濃度，結(jié)果提示：經(jīng)膽管灌注化療與經(jīng)靜脈化療相比，肝臟組織中的藥物濃度更高而血漿中的藥物濃度更低。 結(jié)論: 利用3’-Me-DAB成功建立了大鼠肝內(nèi)膽管癌模型，該模型具有簡便易行、成癌率高、可重復(fù)性強的特點。通過膽管插管、體外轉(zhuǎn)流、經(jīng)導(dǎo)管灌注的方法建立了大鼠經(jīng)膽管連續(xù)灌注模型

5、，證實大鼠可以耐受多次經(jīng)膽管灌注化療藥物。建立了檢測血漿、肝臟組織內(nèi)表阿霉素（EPI）藥物濃度的反相高效液相色譜熒光檢測方法(RP-HPLC)。該方法具有靈敏度高、操作簡單，穩(wěn)定性好的特點。通過對表阿霉素（EPI）的藥代動力學(xué)研究發(fā)現(xiàn)：經(jīng)膽管灌注化療藥物與經(jīng)靜脈給藥的化療方法相比較，肝臟組織內(nèi)的藥物濃度高，而血漿中的藥物濃度低。該給藥方式可以提高組織內(nèi)藥物濃度，可能增強化療藥物的抗腫瘤作用。該研究對經(jīng)膽管灌注化療方法進一步研究和應(yīng)用奠定