載脂蛋白A-I模擬肽D-4F拮抗血管平滑肌細(xì)胞增殖及遷移的機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討載脂蛋白A-I模擬肽D-4F拮抗血管平滑肌細(xì)胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）增殖及遷移的機(jī)制。
　　方法：大鼠胸主動(dòng)脈VSMCs分離與培養(yǎng)。分別給予D-4F及氧化型低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein，ox-LDL）處理VSMCs，CCK-8（Cell counting kit-8）試劑盒來(lái)測(cè)定細(xì)胞增殖，transwell小室和劃痕實(shí)驗(yàn)來(lái)

2、評(píng)估細(xì)胞遷移，而活性氧探針，即雙氫乙酰乙酸一二氯熒光黃（dihydrochloride acetyl acid dichloride fluorescentyellow，DCFH-DA）測(cè)定VSMCs中活性氧簇（reactive oxygen species，ROS）。利用western blotting檢測(cè)D-4F對(duì)VSMCs中P13K/Akt信號(hào)通路磷酸化激活和血紅素加氧酶-1（heme oxygenase-1，HO-1）蛋白表達(dá)。

3、利用P13K/Akt抑制劑LY294002預(yù)孵育VSMCs，western blotting檢測(cè)HO-1蛋白表達(dá)。利用HO-1抑制劑Znpp拮抗VSMCs中HO-1的活性，再次檢測(cè)D-4F對(duì)ox-LDL誘導(dǎo)的ROS釋放以及VSMCs增殖和遷移的抑制作用。
　　結(jié)果：D-4F在體外能夠抑制ox-LDL誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞（VSMCs）的增殖和遷移。D-4F能夠誘導(dǎo)VSMCs中P13K/Akt磷酸化激活，D-4F上調(diào)VSMCs中HO-

4、1蛋白的表達(dá)，PI3K/Akt抑制劑LY294002能夠拮抗D-4F誘導(dǎo)的VSMCs中HO-1蛋白表達(dá)。此外D-4F能夠有效的抑制ox-LDL誘導(dǎo)的VSMCs中ROS的釋放，進(jìn)而抑制ox-LDL誘導(dǎo)的VSMCs的增殖和遷移。HO-1抑制劑Znpp能夠拮抗D-4F的抗氧化與抗增殖和抗遷移活性。
　　結(jié)論：載脂蛋白A-I模擬肽D-4F通過(guò)激活PI3K/Akt通路上調(diào)VSMCs中HO-1蛋白的表達(dá)，以此來(lái)抑制ox-LDL誘導(dǎo)的ROS釋放