miRNA-17對血管平滑肌細胞增殖的調(diào)控機制研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：
　　觀察miRNA-17對人血管平滑肌細胞的增殖作用，以及可能的調(diào)控機制研究。
　　方法：
　　人血管平滑肌細胞培養(yǎng);實驗選用3-5代細胞，待細胞長至70％融合時，將培養(yǎng)的VSMC通過lipo2000轉(zhuǎn)染miRNA-17 mimics（實驗組）及miRNA-17inhibitor（抑制組），或不做轉(zhuǎn)染處理（空白對照組）。通過標記的FAM的表達估計轉(zhuǎn)染效率;用real-time PCR檢測各組細胞miRNA-17

2、的表達水平;用CCK-8法分別檢測各組細胞的增殖情況，利用western blot法檢測轉(zhuǎn)染后各組E2F1蛋白及增殖相關(guān)蛋白PCNA的表達情況。
　　實驗結(jié)果：
　　熒光顯微鏡觀察顯示，6h后細胞的轉(zhuǎn)染效率85％以上;real-time PCR結(jié)果顯示，實驗組VSMC的miRNA-17表達水平明顯高于抑制組（均P＜0.01）;細胞增殖檢測結(jié)果顯示，實驗組的細胞增殖率明顯高于抑制組和空白組(P＜0.01);western bl

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