蜂膠對(duì)血管平滑肌細(xì)胞增殖作用的影響及機(jī)制的研究.pdf

1、目的： 觀察蜂膠水提液（Water Extract Propolis，WEP）對(duì)血管緊張素Ⅱ（Angiotensin Ⅱ，Ang Ⅱ）誘導(dǎo)體外培養(yǎng)的人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞（human umbilical artery smooth musclecell, HUASMC）增殖作用的影響，并探討其作用機(jī)制，為蜂膠抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用提供理論依據(jù)。 方法： 1．組織貼塊法培養(yǎng)HUASMC； 2．分組：培養(yǎng)的HUAS

2、MC隨機(jī)分為4組 對(duì)照組：不加入任何藥物； 模型組：加入100nmol／L的AngⅡ作用24h； 蜂膠組：分別給予50mg／L、100mg／L、200mg／L的WEP預(yù)孵育2h后加入100nmol／L的AngⅡ作用24h； 氯沙坦組：1．5umol／L的氯沙坦預(yù)孵育2h后加入100nmol／L的AngⅡ作用24h。 3．采取細(xì)胞計(jì)數(shù)法檢測(cè)HUASMC數(shù)量； 4．利用流式細(xì)胞儀（flow c

3、ytometry, FCM）分析技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期； 5．通過(guò)免疫細(xì)胞化學(xué)法觀察增殖細(xì)胞核抗原（Proliferating cell nuclear antigen, PCNA）的表達(dá)： 6．采用分光光度計(jì)檢測(cè)培養(yǎng)液中超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase, SOD）及丙二醛（Maleic dialdehyde, MDA）的含量； 7．用TUNEL染色法檢測(cè)細(xì)胞凋亡。 結(jié)果： 1．

4、WEP對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響； 模型組細(xì)胞計(jì)數(shù)高于對(duì)照組和氯沙坦組（P＜0.01），100mg／L和200mg／L蜂膠組低于模型組（P＜0.01）；50mg／L和100mg／L蜂膠組高于氯沙坦組（P＜0.01），200mg／L蜂膠組與氯沙坦組沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。 2．WEP對(duì)G<,0>／G<,1>期細(xì)胞百分比的影響： 模型組G<,0>／G<,1>期細(xì)胞百分比低于對(duì)照組、氯沙坦組（P＜0.01）；100mg／

5、L和200mg／L蜂膠組高于模型組（P＜0.01）：50mg／L蜂膠組低于氯沙坦組（P＜0.05），100mg／L、200mg／L蜂膠組與氯沙坦組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。 3．WEP對(duì)PCNA表達(dá)的影響： 模型組PCNA陽(yáng)性率高于對(duì)照組、氯沙坦組（P＜0.01）：100mg／L和200mg／L蜂膠組低于模型組（P＜0.01），蜂膠各濃度組與氯沙坦組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。 4．WEP對(duì)總SOD活力的影

6、響： 模型組總SOD活力低于對(duì)照組（P＜0.01），也低于氯沙坦組（P＜0.05）；蜂膠各濃度組總SOD活力升高，較模型組、對(duì)照組和氯沙坦組差異顯著（P＜0.01）。 5．WEP對(duì)MDA含量的影響： 模型組MDA含量高于對(duì)照組、氯沙坦組（P＜0.01）；蜂膠各濃度組低于模型組（P＜0.01）；100mg／L、200mg／L蜂膠組低于氯沙坦組（P＜0.01）。 6．WEP對(duì)凋亡指數(shù)（apoptosis in

7、dex，AI）的影響： 模型組AI高于對(duì)照組、氯沙坦組（P＜0.01）；100mg／L和200mg／L蜂膠組低于模型組（P＜0.01）；50mg／L蜂膠組高于氯沙坦組（P＜0.01），100mg／L和200mg／L蜂膠組與氯沙坦組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。 結(jié)論 1．Ang II可誘導(dǎo)體外培養(yǎng)的HUASMC增殖；氯沙坦具有拮抗Ang II增殖的作用； 2．一定濃度的WEP能抑制AngII誘導(dǎo)的HUAS