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文檔簡介
1、白細胞介素12(IL-12)是由B細胞、單核巨噬細胞等抗原遞呈細胞分泌的一種異二聚體細胞因了.研究表明,IL-12能促進NK細胞和T細胞的增殖、活化及細胞毒作用;促進巨噬細胞的活化和多種細胞因子產生;調節(jié)Th0細胞向Th1細胞分化發(fā)育,增強細胞免疫功能.上述生物學功能提示,IL-12在抗腫瘤免疫中發(fā)揮著重要作用.這在多種腫瘤包括B16F10黑色素瘤、Renca腎細胞癌、Lewis肉瘤等模型中已得到證實.然而,體內直接注射IL-12蛋白所
2、致的毒副作用限制了其臨床應用.自Wolff等(1990年)提出基因治療的新方法——裸DNA(nakedDNA)直接注射以來,為解決該問題提供了新思路.質粒DNA注入體內可在局部細胞表達分泌,使局部組織積聚高濃度的IL-12,改善腫瘤的微環(huán)境,激發(fā)抗腫瘤免疫應答,且血清中的IL-12較低,避免全身性的毒副作用.實驗目的:利用雙CMV啟動子構建小鼠IL-12(mIL-12)雙亞基共表達的真核表達質粒pCmIL-12.并將pCmIL-12在體
3、內外進行表達,觀察其在體外能否表達有生物學活性的mIL-12以及體內增強NK細胞活性的潛能,為進行mIL-12腫瘤基因治療研究奠定基礎.實驗結論: 1、研究人員構建的pCmIL-12質粒在體外能夠表達mIL-12,而且作用強于pC35和pC40同時轉染細胞的表達上清.2、pCmIL-12質粒在小鼠體內表達后亦能顯著增強NK細胞的活性,而且其活性高于體外的表達上清.pC35和pC40在體內卻不能表達有活性的IL-12.3、pCmIL-12
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