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文檔簡介
1、第一部分癲癇持續(xù)狀態(tài)后大鼠海馬CB1受體隨時(shí)間演變規(guī)律
研究背景及目的:癲癇為神經(jīng)系統(tǒng)常見疾病,癲癇持續(xù)狀態(tài)為神經(jīng)內(nèi)科一種常見的急危重癥,具有較高的死亡率和致殘率,苯二氮卓類藥物為控制癲癇持續(xù)狀態(tài)(Status Epilepticus SE)的首選,但在臨床實(shí)踐及研究中發(fā)現(xiàn)癲癇持續(xù)狀態(tài)后延遲給藥將大大降低控制SE的效果。內(nèi)源性的大麻素可能是通過CB1R(大麻素受體1)逆行信使介導(dǎo)并調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)的釋放,在控制癲癇及終止癲癇持續(xù)狀
2、態(tài)中有較強(qiáng)的作用。本研究擬觀察CB1R在癲癇持續(xù)狀態(tài)大鼠海馬中的分布及隨時(shí)間的演變規(guī)律,探討大麻素受體在癲癇持續(xù)狀態(tài)發(fā)生發(fā)展中的作用,為癲癇及持續(xù)狀態(tài)的治療尋找新的靶點(diǎn)。
方法:采用海人酸(KA)腹腔注射誘導(dǎo)大鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)模型,于持續(xù)狀態(tài)30min后終止發(fā)作,在終止發(fā)作后的4h、1d、1周、1個(gè)月、2個(gè)月行免疫組化和Western印跡方法檢測CB1R的變化情況。采用單因素方差分析、獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn)及秩和檢驗(yàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)
3、分析。
結(jié)果:
1.KA組大鼠在癲癇持續(xù)狀態(tài)后CB1R在海馬CA1區(qū)的積分吸光度(IA)均呈先升高后降低的趨勢,且在1周之內(nèi)CB1R逐漸升高,1周后CB1R逐漸降低,在4h、1d、1周與NS組之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
2.KA組大鼠在癲癇持續(xù)狀態(tài)后CB1R在海馬CA3區(qū)的IA變化規(guī)律與CA1區(qū)一致,
即癲癇持續(xù)狀態(tài)后CB1R的IA均呈先升高后降低趨勢,在1周之內(nèi)CB1R逐漸升高,1
4、周后CB1R逐漸降低,在4h、1d、1周與NS組之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
3.KA組大鼠在癲癇持續(xù)狀態(tài)后CB1R在海馬DG區(qū)的IA變化規(guī)律與CA1區(qū)和CA3區(qū)一致,即癲癇持續(xù)狀態(tài)CB1R的IA均呈先升高后降低趨勢,在1周之內(nèi)CB1R逐漸升高,1周后CB1R逐漸降低,在4h、1d、1周與NS組之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:CB1R在癲癇持續(xù)狀態(tài)后的大鼠海馬中呈現(xiàn)保護(hù)性的升高之后恢復(fù)至正
5、常水平,表明CB1R與癲癇的發(fā)生和終止存在一定的關(guān)系。
第二部分癲癇持續(xù)狀態(tài)大鼠海馬中OX1受體隨時(shí)間演變規(guī)律
研究背景及目的:癲癇為神經(jīng)科的常見疾病,以反復(fù)發(fā)作為特點(diǎn),對(duì)認(rèn)知和記憶均有損害,且癲癇持續(xù)狀態(tài)為急危重癥,具有較高的死亡率和致殘率。食欲素主要通過與食欲素受體(OX1 R, Orexin receptor-1)或食欲素受體2(OX2R, Orexinreceptor-2)相結(jié)合形成突觸傳遞系統(tǒng)來發(fā)揮其生理作
6、用。OX1R和OX2R在海馬神經(jīng)元高度表達(dá),且有報(bào)道發(fā)現(xiàn)反復(fù)癲癇發(fā)作患者腰穿腦脊液中Orexin-A(食欲素A)濃度較非癲癇患者降低,提示Orexin-A可能與癲癇發(fā)作有著一定的聯(lián)系,而Orexin-A主要作用于OX1R,其結(jié)合能力約為OX2R的10倍,本研究旨在觀察OX1R在癲癇持續(xù)狀態(tài)模型大鼠海馬中隨時(shí)間的演變規(guī)律,探討Orexins在癲癇持續(xù)狀態(tài)中的可能作用。
方法:采用海人酸(KA,Kainic Acid)腹腔注射誘導(dǎo)
7、大鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)的模型,在癲癇持續(xù)狀態(tài)30min后終止發(fā)作,分別于終止發(fā)作后4h、1d、1周、1個(gè)月、2個(gè)月處死大鼠,行免疫組化和Western-blot方法檢測OX1R在大鼠海馬CA1、CA3及齒狀回內(nèi)的變化情況。采用單因素方差分析、獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn)及秩和檢驗(yàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
結(jié)果:
1.OX1R的積分吸光度值(IA)在兩組海馬CA1區(qū)呈現(xiàn)持續(xù)升高趨勢,KA組在4h、1d、1周、1個(gè)月、2個(gè)月時(shí)均高于NS組
8、,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05);時(shí)間點(diǎn)1d、1周分別與同組內(nèi)4h時(shí)OX1R的表達(dá)情況比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05),1個(gè)月、2個(gè)月與4h組內(nèi)的差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.01)。
2.兩組大鼠海馬CA3區(qū)OX1R的IA值均呈持續(xù)升高的趨勢,KA組在4h、1d、1周、1個(gè)月、2個(gè)月時(shí)均高于NS組,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05);1d、1周分別與同組內(nèi)4h時(shí)OX1R的分布情況相比較,均為差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.0
9、5),1個(gè)月、2個(gè)月與4h組之間的差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.01)。
3.兩組OX1R的IA值在海馬齒狀回(Dentate gyrus,DG)呈現(xiàn)持續(xù)升高趨勢,KA組在4h、1d、1周、1個(gè)月、2個(gè)月時(shí)均高于NS組,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)的意義(p>0.05);KA組和NS組內(nèi)1d與4h之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05),1周、1個(gè)月、2個(gè)月與4h組之間的差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。
結(jié)論:在癲癇持續(xù)狀態(tài)大鼠及
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