己酮可可堿對實驗性非酒精性脂肪性肝炎的療效及其作用機制的研究.pdf

1、背景和目的：非酒精性脂肪性肝病(Non-alcoholicfattyliverdiseaesNAFLD)的發(fā)病機制復雜，其中促炎細胞因子在造成肝細胞損傷的“第二次打擊”中起著非常重要的作用。TNF-a是介導肝損傷的主要促炎因子，誘發(fā)炎癥反應、肝壞死，可直接或間接地對肝細胞造成損害，并參與非酒精性脂肪性肝炎(Non-alcoholicsteatohepatitis，NASH)肝纖維化的發(fā)生與發(fā)展。己酮可可堿(pentoxifylline,

2、PTX)是一種非選擇性磷酸二酯酶抑制劑。研究顯示，PTX可抑制腫瘤壞死因子α(TNF-α)mRNA的表達，從而減少TNF-α產(chǎn)生。本實驗以NASH大鼠為模型，進一步觀察PTX對NASH的療效，并應用免疫組織化學方法研究肝組織TNF-α的表達情況，以探索PTX的作用機制。 材料與方法：雄性SD大鼠40只，隨機分為3組，分別進行以下處理：(1)正常對照組10只：喂養(yǎng)普通飼料至16周。(2)模型組20只：喂養(yǎng)高脂飼料，12周后隨機處死

3、10只，病理均證實為非酒精性脂肪性肝炎。另外10只繼續(xù)喂養(yǎng)高脂飼料至16周。(3)治療組10只：喂養(yǎng)高脂飼料至12周，在制備模型后用己酮可可堿(16mgkg-1.d-1)灌胃4周。實驗16周后處死所有剩余大鼠。取肝組織，迅速置于Bowin液中固定，做常規(guī)石蠟切片，蘇木精和伊紅(HaematoxylinandEasin，HE)染色，進行光鏡觀察，炎癥活動度計分。檢測體重(Bodyweight)、肝指數(shù)(Liverindex)、血清谷丙轉(zhuǎn)氨

4、酶(AlanineAminotransferase，ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartateAminotransferase，AST)、甘油三酯(triglyceridesTG)、膽固醇(cholesterolTC)、空腹血糖(fastingbloodglyceamiaFBG)、胰島素(insulineINS)及透明質(zhì)酸酶(hyaluronicHA)水平。應用免疫組織化學SP法進行TNF-α染色，采用計算機圖像系統(tǒng)，分析和觀察TNF-α

5、在肝組織中表達的動態(tài)變化。實驗結(jié)果統(tǒng)計采用SPSS11.0軟件進行分析，P＜0.05為差異有顯著性意義。 結(jié)果：1、模型組大鼠體重、肝指數(shù)明顯高于正常對照組(P＜0.01)，PTX治療組體重、肝指數(shù)均顯著降低(P＜0.05)；2、模型組大鼠血清ALT、AST明顯增高，與正常對照組比較有非常顯著性差異(P＜0.01)，治療組血清AST顯著下降，與模型組相比較有非常顯著性差異(P＜0.01)；而血清ALT兩組比較無差異。3、模型組血

6、清TC、FBG明顯升高，與正常對照組比較有顯著性差異(P＜0.05)，治療組血清TC、FBG明顯下降，與模型組比較差異有顯著性意義(P＜0.05)。4、治療組血清HA水平與對照組比較明顯下降(P＜0.05)。5、組織學觀察顯示治療組肝組織炎癥壞死程度明顯減輕，炎癥活動度計分明顯下降(P＜0.01)。6、TNF-α在肝臟中的陽性細胞表達率模型組較對照組明顯升高(P＜0.01)，治療組陽性細胞表達率顯著下降(P＜0.01)。 結(jié)論：