豹皮樟總黃酮對(duì)非酒精性脂肪性肝炎的預(yù)防作用及部分機(jī)制.pdf

1、非酒精性脂肪肝(nonalcoholicfattyliverdieases，NAFLD)是病理組織學(xué)改變與酒精肝相似，具有脂肪變性、肝細(xì)胞損傷及炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，但無明確過量飲酒史的一種慢性肝病。其疾病譜隨病程的進(jìn)展表現(xiàn)不一，包括單純性脂肪肝、脂肪性肝炎(nonalcoholicsteatohepatitis，NASH)、脂肪性肝纖維化和脂肪性肝硬化4個(gè)病理過程。NASH是NAFLD向肝纖維化和肝硬化發(fā)展的重要中間環(huán)節(jié)。由于NASH動(dòng)物模型

2、的缺乏，嚴(yán)重阻礙了對(duì)NASH發(fā)病機(jī)制、預(yù)防和治療的研究。其發(fā)病機(jī)制至今未明，目前臨床上主要使用調(diào)血脂藥聯(lián)合肝細(xì)胞保護(hù)劑或抗氧化劑進(jìn)行NASH的防治，但安全性和療效尚需進(jìn)一步評(píng)價(jià)。 豹皮樟，又名老鷹茶，系樟科木姜子屬毛豺皮樟(LitseaCoreanalevel)的葉，是我國南方各民族民間長(zhǎng)期飲用的一種植物代用茶，具有清涼止渴、解毒消腫、明目健胃等功效。老鷹茶中含有多種活性成分，經(jīng)我院天然藥物化學(xué)教研室研究，確定了豹皮樟的有效部位

3、為總黃酮(Totalflavonoids)。目前關(guān)于老鷹茶的實(shí)驗(yàn)研究資料較少，其藥理作用僅見抗氧化實(shí)驗(yàn)研究，我們前期研究表明豹皮樟總黃酮(totalFlavonoidsofLitseaCoreanaLevel，TFLC)具有顯著的抗炎免疫作用。 本文首先通過改進(jìn)脂肪乳劑灌胃的方法建x~_SD大鼠NASH模型，在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步研究了豹皮樟總黃酮對(duì)NASH的預(yù)防作用及其部分機(jī)制，主要內(nèi)容概括如下： 1．SD大鼠NASH模型的

4、建立 通過改進(jìn)配方的脂肪乳劑灌胃的方法誘導(dǎo)大鼠NASH模型。比較了豬油和花生油對(duì)大鼠脂肪肝形成的影響，結(jié)果顯示，豬油和花生油造模大鼠血清ALT、AST、TC、LDL-C及肝臟TC、TG均顯著增高；花生油造模還可升高大鼠血清TG、FFA和肝臟FFA，降低血清HDL-C。病理組織學(xué)檢查提示，各模型組大鼠肝細(xì)胞呈現(xiàn)彌漫性脂肪變性，花生油模型組并有炎癥病灶。對(duì)花生油模型的進(jìn)一步研究表明，模型組產(chǎn)生了明顯的胰島素抵抗，肝臟細(xì)胞色素CYP2

5、E1表達(dá)明顯增高而過氧化物酶體增生物激活受體α(peroxisomeProliferator-activatedreceptorα，PPAR僅)表達(dá)顯著降低。提示采用花生油是更好的誘導(dǎo)大鼠模型的方法。 2．TFLC對(duì)SD大鼠NASH的預(yù)防作用 給予SD大鼠脂肪乳劑誘導(dǎo)NASH模型的同時(shí)給予TFLC(100、200、400mg／kg)，與模型組比較，TFLC能顯著降低大鼠肝臟指數(shù)，血清ALT、AST、LDL-C、TC、TG

6、、FFA和肝勻漿TC、TG、FFA水平，并顯著升高血清HDL-C。病理組織學(xué)檢查結(jié)果表明給予TFLC后可明顯減輕肝臟脂肪變性程度，并減輕炎癥反應(yīng)。以上結(jié)果提示：TFLC對(duì)由高脂乳劑誘導(dǎo)的SD大鼠NASH有明顯的預(yù)防作用。 3．TFLC對(duì)SD大鼠NASH預(yù)防作用的機(jī)制研究 與模型組比較，TFLC顯著降低大鼠血清NO、TNF-c~，肝勻漿MDA含量，升高血清瘦素(Leptin)、胰島素(INS)水平，并增加肝勻漿SOD活性。

7、同時(shí)TFLC抑制肝臟細(xì)胞色素CYP2E1表達(dá)而升高PPAR~的表達(dá)。電鏡對(duì)肝細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)觀察結(jié)果顯示，給予TFLC后線粒體腫脹程度明顯減輕，結(jié)構(gòu)較模型組清晰。以上研究結(jié)果提示：TFLC對(duì)SD大鼠NASH的預(yù)防作用可能與其抗脂質(zhì)過氧化，抑制TNF-{~產(chǎn)生，調(diào)節(jié)Leptin、INS水平，抑制肝臟CYP2E1表達(dá)而上調(diào)PPARα表達(dá)和對(duì)線粒體的保護(hù)作用有關(guān)。 4．TFLC對(duì)SD大鼠腹腔巨噬細(xì)胞和Kupffer細(xì)胞功能的影響

8、TFLC明顯抑制體外LPS刺激大鼠腹腔巨噬細(xì)胞NO生成，抑制LPS誘導(dǎo)NASH大鼠Kupffer細(xì)胞核NF-r．B和胞漿iNOS表達(dá)。提示：TFLC預(yù)防NASH形成與其抑制Kupffer細(xì)胞活性有關(guān)。而PPARo[非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑MK886可部分翻轉(zhuǎn)TFLC對(duì)NASH大鼠Kupffer細(xì)胞核NF-r．B和胞漿iNOS表達(dá)的抑制作用。提示TFLC不但可以上調(diào)肝組織PPARα的表達(dá)，而且對(duì)Kupffer細(xì)胞PPARα受體有激活作用。TFLC的