網(wǎng)絡(luò)抗氧化劑對非酒精性脂肪性肝炎的防治及機制研究.pdf

1、背景：
　　非酒精性脂肪性肝?。╪on-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）是指除外酒精和其他明確的肝損害因素所致的，以彌漫性肝細胞大泡性脂肪變?yōu)橹饕卣鞯呐R床病理綜合征，包括單純性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎（non-alcoholic steatohepatitis,NASH）、肝硬化和肝癌，是臨床常見的慢性肝病。NASH是NAFLD的一種類型，是由單純性脂肪肝發(fā)展至肝纖維化、肝硬化甚至肝癌的

2、關(guān)鍵轉(zhuǎn)折點。因此，NASH愈來愈受到人們的重視，然而，NASH發(fā)病機制復(fù)雜，至今尚未完全闡明，目前公認(rèn)的“二次打擊”學(xué)說認(rèn)為氧化物和抗氧化劑之間失衡造成的氧化應(yīng)激及大量活性氧（reactive oxygen species,ROS）氧化不飽和脂質(zhì)引起的脂質(zhì)過氧化均可導(dǎo)致NASH的發(fā)生及發(fā)展。目前仍缺乏確實有效的治療方法。國內(nèi)外學(xué)者從調(diào)脂、改善胰島素抵抗、調(diào)整生活方式等不同治療方法進行了大量基礎(chǔ)實驗和臨床實驗研究，但結(jié)論不一，亦存在諸多爭

3、議。故對其發(fā)病機制及干預(yù)措施的研究尤為迫切。
　　目的：
　　通過建立高脂飲食誘導(dǎo)的大鼠NASH模型，監(jiān)測氧化應(yīng)激指標(biāo)在NASH發(fā)病過程中的變化，評估氧化應(yīng)激在NASH發(fā)病中的作用；予網(wǎng)絡(luò)抗氧化劑干預(yù)治療，通過阻遏氧化應(yīng)激損傷觀察NASH的轉(zhuǎn)歸，明確網(wǎng)絡(luò)抗氧化劑是否具有防治NASH的作用，進一步探討氧化應(yīng)激與NASH發(fā)病機制的關(guān)系。
　　方法：
　　本研究通過建立高脂飲食誘導(dǎo)的大鼠NASH模型，動態(tài)觀察肝組織病理

4、、肝功能、血脂及氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)的改變，從形態(tài)學(xué)、血液生化、氧化損傷等不同角度評估NASH的發(fā)生、發(fā)展，探索氧化應(yīng)激、脂質(zhì)過氧化損傷在NASH發(fā)病機制中的作用。運用網(wǎng)絡(luò)抗氧化劑（維生素C、維生素E、輔酶Q10、硫辛酸、還原型谷胱甘肽）進行干預(yù)，采取預(yù)防性用藥和治療性用藥兩種給藥方式，觀察運用抗氧化劑后NASH的轉(zhuǎn)歸情況，進一步評判氧化應(yīng)激、脂質(zhì)過氧化在NASH發(fā)病機制中的作用，并對比兩種給藥方式對于病情轉(zhuǎn)歸的影響，探索給藥時機與NASH

5、進展之間的關(guān)系；同時設(shè)立二甲雙胍、氟伐他汀治療對照組，從橫向觀察、對比三種不同類藥物治療后NASH的轉(zhuǎn)歸，從不同角度對比、篩選較優(yōu)治療方案。
　　結(jié)果：
　?。?）成功建立了高脂飲食誘導(dǎo)的NASH動物模型，肝組織HE染色呈現(xiàn)以大泡性脂肪變性為主，伴隨不同程度的炎細胞浸潤，脂肪變及炎癥的嚴(yán)重程度隨造模時間的延長逐漸加劇，12周時部分出現(xiàn)肝纖維化；初步證明在NASH發(fā)生、發(fā)展過程中，氧化應(yīng)激、脂質(zhì)過氧化損傷持續(xù)存在，且與病變的嚴(yán)

6、重程度呈正相關(guān)。本實驗觀察到在高脂飲食8周時就已出現(xiàn)超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性的下降，隨著脂肪變的加重及炎癥計分的增高，丙二醛（Malondialdehyde,MDA）也呈增高趨勢，SOD活性呈下降趨勢，在造模12周MDA含量升高較為明顯。
　?。?）明確網(wǎng)絡(luò)抗氧化劑對于高脂飲食誘導(dǎo)的大鼠NASH模型有一定的防治效果，進一步證實了氧化應(yīng)激、脂質(zhì)過氧化損傷在NASH發(fā)病機制中的重要作用。網(wǎng)

7、絡(luò)抗氧化劑組8周、10周、12周血清、肝組織中MDA含量與模型組動態(tài)比較均呈明顯下降趨勢，SOD活性與模型組動態(tài)比較均呈明顯上升趨勢，ALT、AST及炎癥計分均較模型組下降。
　?。?）網(wǎng)絡(luò)抗氧化劑早期應(yīng)用效果較好，可見病變早期保持機體較強的抗氧化能力，減輕自由基造成的損傷，可有效控制疾病的進展，治療時機應(yīng)選擇早期干預(yù)。血清生化檢測提示網(wǎng)絡(luò)抗氧化劑治療組AST、MDA含量顯著高于預(yù)防組，SOD活性顯著低于預(yù)防組；組織病理顯示脂肪變

8、及炎癥等病變重于預(yù)防組。
　?。?）網(wǎng)絡(luò)抗氧化劑、二甲雙胍及氟伐他汀三種不同藥物對于高脂飲食誘導(dǎo)的大鼠NASH模型均有一定的治療效果，網(wǎng)絡(luò)抗氧化劑治療組肝組織病理改善優(yōu)于其他治療組，但各治療方法均有所長。網(wǎng)絡(luò)抗氧化劑治療組大鼠肝組織脂肪變性、炎癥計分及MDA均低于其他兩組；氟伐他汀組TC下降較其他治療組明顯；二甲雙胍組空腹血糖、血胰島素水平及胰島素抵抗指數(shù)低于其他治療組。
　　結(jié)論：
　　本課題通過成功復(fù)制高脂飲食誘發(fā)