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文檔簡介
1、目的:探討云芝氯仿萃取物對肝癌HepG-2細胞的凋亡作用及其作用機制。
方法:以人肝癌細胞HepG-2為實驗對象,用不同濃度的云芝氯仿萃取物處理不同時間后,MTT Assay方法檢測云芝氯仿萃取物對肝癌HepG-2細胞生存抑制率的影響;細胞HE染色方法觀察云芝氯仿萃取物對肝癌HepG-2細胞形態(tài)學變化;DNA ladder方法檢測云芝氯仿萃取物對肝癌HepG-2細胞DNA片段的影響;蛋白免疫印記(Western Blottin
2、g)方法檢測云芝氯仿萃取物對肝癌HepG-2細胞的Bax、Bcl-2及 Caspase-3蛋白表達的影響;從而探討云芝氯仿萃取物對 HepG-2細胞的作用及機制。
結(jié)果:云芝氯仿萃取物可以促進肝癌HepG2的凋亡。MTT結(jié)果顯示,云芝氯仿萃取物可以抑制肝癌HepG-2細胞的增殖,隨著時間的延長和藥物濃度的增加,其抑制作用越明顯,當藥物濃度為200μmol/L作用時間為48 h時,對HepG-2細胞的抑制率為52.3%,接近半數(shù)
3、抑制濃度(IC50)。HE染色結(jié)果顯示:云芝氯仿萃取物處理的肝癌HepG-2細胞,與對照組相比細胞間距增大,細胞變小、失去原有形態(tài)、細胞核皺縮、染色變深、細胞碎裂、可見凋亡小體,并且隨著時間和劑量的增加凋亡程度越嚴重。DNA ladder方法檢測結(jié)果顯示,與對照組相比較,云芝氯仿萃取物低、中、高劑量組作用48h時HepG-2細胞DNA降解成DNA片段,并隨著劑量增加,降解作用越明顯。Western方法檢測云芝氯仿萃取物作用HepG-2細
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