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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:研究組蛋白去乙?;敢种苿┪鬟_(dá)本胺對(duì)胃癌細(xì)胞株SGC-7901的體外抗增殖作用及相關(guān)的作用機(jī)制。
方法:應(yīng)用MTT法檢測(cè)西達(dá)本胺對(duì)SGC-7901細(xì)胞的增殖抑制率;采用Annexin V/PI雙染流式細(xì)胞術(shù)分析SGC-7901細(xì)胞凋亡比例;逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reversetranscription-polymerase chain reaction,RT-PCR)檢測(cè)沉默信息調(diào)節(jié)因子2相關(guān)酶1(silentmatin
2、g type information regulator2 homolog1,SIRT1)、組蛋白去乙?;?1(histonedeacetylase11,HDAC11)mRNA的表達(dá)情況,實(shí)時(shí)熒光定量-聚合酶鏈反應(yīng)(Real-timequantitative-polymerase chain reaction,RT-qPCR)檢測(cè)表皮生長(zhǎng)因子受體(epithelial growthfactor receptor,EGFR)mRNA的表
3、達(dá)情況,并用全自動(dòng)DNA測(cè)序儀對(duì)EGFR基因進(jìn)行測(cè)序;蛋白免疫印跡法(Western Blot)檢測(cè)Notch1蛋白的表達(dá)情況。所有實(shí)驗(yàn)均重復(fù)3次,結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,P<0.05被認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:在16-256μmol/L濃度范圍內(nèi),西達(dá)本胺可劑量依賴性地抑制SGC-7901細(xì)胞增殖(P<0.05),24h、48h、72h的IC50分別為(168.11±16.02)μmol/L、(121.46±9.3
4、3)μmol/L、(66.59±5.62)μmol/L。經(jīng)32、64、128μmol/L西達(dá)本胺作用48h后,細(xì)胞凋亡率分別為(31.98±0.79)%、(73.94±1.92)%、(89.60±0.82)%,明顯高于對(duì)照組(9.02±1.18)%(P<0.05);而SIRT1、HDAC11、EGFR mRNA表達(dá)降低(P<0.05);Notch1蛋白表達(dá)亦降低(P<0.05)。
結(jié)論:西達(dá)本胺可抑制SGC-7901細(xì)胞增殖,
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