糖基化基質(zhì)影響人皮膚成纖維細胞增殖凋亡的研究.pdf

1、一、研究背景 皮膚組織的正常代謝和創(chuàng)面愈合的有序過程是細胞和細胞外基質(zhì)之間相互影響的結(jié)果。糖尿病狀態(tài)下源于糖代謝紊亂的基質(zhì)糖基化改變使細胞所處微環(huán)境異常，可能是修復細胞生物學行為變化的重要原因。 二、研究目的 闡述糖尿病皮膚組織和潰瘍創(chuàng)面中細胞增殖凋亡狀態(tài)；通過體外建立糖基化ECM模型模擬細胞的生存環(huán)境，了解皮膚微環(huán)境改變與細胞增殖凋亡調(diào)控之間的相關性；明確糖基化基質(zhì)對細胞增殖凋亡事件的調(diào)控效應和作用環(huán)節(jié)，從而在

2、細胞增殖凋亡調(diào)控環(huán)節(jié)上對糖尿病皮膚“隱性損害”及創(chuàng)面修復延遲的機制進行初步探討三、研究內(nèi)容： 1．糖尿病皮膚組織及潰瘍創(chuàng)面細胞的增殖凋亡狀態(tài) 觀察正常人和糖尿病患者皮膚和創(chuàng)面組織的組織學表現(xiàn)；檢測皮膚和創(chuàng)面組織PCNA、cyclinBl和凋亡細胞表達；測定皮膚組織中p53、Bcl-2和Bax的含量。 2．糖基化基質(zhì)體外模型的建立及其對人皮膚成纖維細胞增殖凋亡的影響組織標本檢測AGE分布；糖基化基質(zhì)體外模型的建立和

3、鑒定及其對FB存活率，細胞周期和凋亡的影響。 3．糖基化基質(zhì)影響人皮膚成纖維細胞增殖凋亡的機制研究組織標本檢測RAGE、p-ERKl／2和p-p38的表達；根據(jù)接種于對照或糖基化基質(zhì)，是否用RAGE抗體或U0126或SB203580干預，分成不同的組別，測定細胞存活率，細胞周期和凋亡；細胞p-ERKl／2、p-p38、p53、Bax、Bcl-2的蛋白表達以及cyclinDl、cyclinBl、P53和P21的mRNA表達水平四、

4、研究結(jié)果和結(jié)論： 1. 無外源性損傷時，糖尿病皮膚組織中凋亡細胞增加，相關的凋亡調(diào)控蛋白表達異常；糖尿病潰瘍創(chuàng)面中修復細胞的增殖能力明顯減弱和凋亡細胞的增加，可能是糖尿病創(chuàng)面肉芽形成障礙的原因之一。 2. 糖尿病皮膚組織中糖基化ECM蓄積，真皮細胞表面RAGE表達增強，糖基化基質(zhì)經(jīng)RAGE介導上調(diào)p53和p21基因表達影響細胞周期的有序運行，調(diào)控Bcl-2家族蛋白的表達促進細胞凋亡；皮膚組織中糖基化ECM蓄積是細胞功能