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文檔簡介
1、本文旨在研究人與豬皮膚成纖維細(xì)胞在PGA上增殖與基質(zhì)分泌,探討皮膚成纖維細(xì)胞作為肌腱組織工程種子細(xì)胞的可行性。因此,采用酶消化法獲取人與豬皮膚成纖維細(xì)胞,體外培養(yǎng)擴(kuò)增,收集第2代細(xì)胞,通過倒置顯微鏡觀察形態(tài)學(xué)特征;以1500/孔接種于96孔板通過MTT法比較兩種細(xì)胞生長規(guī)律;免疫組化法及RT-PCR比較研究兩種細(xì)胞在二維培養(yǎng)條件下的膠原分泌。以1×106/ml的密度接種至聚羥基乙酸(PGA)制成的圓柱形三維支架材料上體外培養(yǎng)。通過倒置顯
2、微鏡形態(tài)學(xué)觀察、大體觀察、組織學(xué)和羥脯氨酸定量測定,比較兩種細(xì)胞在聚羥基乙酸(PGA)支架的粘附、增殖及基質(zhì)分泌能力。結(jié)果發(fā)現(xiàn),人皮膚成纖維細(xì)胞在聚羥基乙酸(PGA)三維支架上增殖和基質(zhì)分泌良好,基質(zhì)隨時間的推移逐漸增多。豬皮膚成纖維細(xì)胞在聚羥基乙酸(PGA)三維支架上增殖與基質(zhì)分泌均差,隨時間的推移細(xì)胞逐漸脫落死亡。因此,人皮膚成纖維細(xì)胞可以作為種子細(xì)胞在聚羥基乙酸(PGA)三維支架上體外構(gòu)建組織工程化肌腱,豬皮膚成纖維細(xì)胞有待進(jìn)一步
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