人CD81的克隆和表達(dá)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、該課題包括三個(gè)組成部分.首先,獲取CD81的全編碼序列和EC2區(qū)碼序列:從外周血淋巴細(xì)胞中提取總RNA,通過(guò)RT-PCR獲得cDNA,進(jìn)一步用設(shè)計(jì)的特異引物獲得相應(yīng)序列.測(cè)序結(jié)果表明我們獲得了正確的目標(biāo)序列.第二,在大腸桿菌中表達(dá)重組融合IL1-EC2:構(gòu)建表達(dá)質(zhì)粒pIL1-EC2,經(jīng)PCR擴(kuò)增、雙酶切反應(yīng)、測(cè)序鑒定表明質(zhì)粒構(gòu)建正確.質(zhì)粒轉(zhuǎn)化HB101菌株后.初步活性研究表明IL1-EC2能結(jié)合E2蛋白,結(jié)合呈現(xiàn)濃度依賴關(guān)系.第三,在C

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