結(jié)核分枝桿菌烯酰輔酶A水合酶的克隆、表達(dá)及其性質(zhì)研究.pdf

1、西南大學(xué)碩士學(xué)位論文結(jié)核分枝桿菌烯酰輔酶A水合酶的克隆、表達(dá)及其性質(zhì)研究姓名：王翠平申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：微生物與生化藥學(xué)指導(dǎo)教師：謝建平20070501兩南大學(xué)碩十學(xué)伊論文中文摘要％同源，以小鼠的dub2B為模板對牛型結(jié)核分枝桿菌echAl8進(jìn)行建模。通過比較所建的兩個模型，發(fā)現(xiàn)它們的立體結(jié)構(gòu)相似，都形成了一個Loop結(jié)構(gòu)。在結(jié)核分枝桿菌中，參與脂肪酸代謝的酶或蛋白大約有250類，烯酰輔酶A水合酶又是表達(dá)量比較高的一類，以H37Rv

2、echAl8為中心，預(yù)測蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)，以全面了解它的代謝機(jī)制。結(jié)果顯示重組echAl8基因工程菌構(gòu)建成功，純化方案簡單可行，得到的重組echAl8純度達(dá)到80％以上。實(shí)驗(yàn)測得的二級結(jié)構(gòu)與網(wǎng)上預(yù)測的基本一致，弘螺旋大約占3286％，瞄i疊1596％，比例最大的是無規(guī)則卷曲5117％。在預(yù)測的MTBechAl8活性中心區(qū)IAAvRGI^=、，GGGCEI。ATACDv附近，序列相對保守。相應(yīng)地，138～157位這一段保守序列所形成的m

3、螺旋，是保守的跨膜區(qū)域，與模建的3嘲比較發(fā)現(xiàn)，這一區(qū)域在三級結(jié)構(gòu)上形成一個Loop結(jié)構(gòu)。由于138～157位是跨膜區(qū)，推測活性位點(diǎn)可能疏水的。在整個結(jié)構(gòu)中，I～137位膜內(nèi)，157～213位在膜外；其中大的螺旋分別位于65～78位，116～131位，143～155位，181～199位氨基酸，折疊位于40～56位，84～9啦等。蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)顯示。在mcdiulnconfidence為040情況下，echAl8與其體內(nèi)的17中物質(zhì)有相