ERCC1基因在食管鱗狀細胞癌中的表達及和Survivin、KI-68表達的相關(guān)性研究.pdf

1、第一部分:ERCC1蛋白質(zhì)在食管鱗狀細胞癌中的表達及和Survivin、Ki-67表達的相關(guān)性研究
　　目的:腫瘤的發(fā)生、發(fā)展是細胞中多種基因表達改變累積、互相作用復雜的病理過程，DNA修復基因的改變也是其中重要的一個環(huán)節(jié)。切除修復交叉互補基因1（ERCC1基因）編碼一種單鏈DNA核酸內(nèi)切酶，該酶是核苷酸切除修復(NER)途徑的關(guān)鍵酶。ERCC1基因mRNA和蛋白質(zhì)表達水平可以反映NER途徑中DNA的修復活性，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、

2、放化療效果和預后的關(guān)系密切。本課題的目的是研究食管鱗狀細胞癌中ERCC1蛋白質(zhì)表達與癌旁正常食管粘膜表達的差異及與臨床病理特征的關(guān)系，ERCC1和Survivin、Ki-67蛋白質(zhì)表達的相關(guān)性以進一步探討其作用機制，ERCC1蛋白質(zhì)表達是否為手術(shù)切除食管鱗狀細胞癌獨立的預后因素。
　　方法:70例食管鱗狀細胞癌患者術(shù)后腫瘤組織蠟塊，取癌旁＞5cm正常食管粘膜組織蠟塊41例作為對照。所有患者術(shù)前未行放、化療，排除雙原發(fā)癌及出現(xiàn)遠處轉(zhuǎn)

3、移者，用免疫組織化學方法檢測ERCC1、Survivin、Ki-67蛋白質(zhì)表達情況，用SPSS16.0統(tǒng)計學軟件分析ERCC1蛋白質(zhì)表達與正常食管粘膜表達的差異及與食管鱗狀細胞癌組織的分化程度、浸潤深度、腫瘤長度、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間的關(guān)系。用Spearman等級相關(guān)分析ERCC1與Survivin蛋白質(zhì)表達的相關(guān)性，ERCC1與Ki-67表達的相關(guān)性。用Cox回歸模型分析ERCC1、Survivin、Ki-67標記指數(shù)、腫瘤浸潤深

4、度、腫瘤細胞分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)、臨床分期、術(shù)后放化療這些因素中影響預后的獨立因素。
　　結(jié)果:
　　1、70例食管鱗狀細胞癌組織中46例ERCC1陽性表達，陽性表達率65.7％(46/70)，顯著高于癌旁正常食管粘膜組織9.8％(4/41)(P＜0.01)。70例食管鱗狀細胞癌組織中42例Survivin陽性表達，陽性表達率60.0％(42/70)，顯著高于癌旁正常食管粘膜組織19.5％(8/41)(P＜0.01)。<

5、br>　　2、食管鱗狀細胞癌組織的不同分化程度（x2=1.061，P＞0.05）、浸潤深度(x2=0.531，P＞0.05)、腫瘤長度(x2=0.206，P＞0.05)、臨床分期(x2=0.225，P＞0.05)、及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)(x2=0.078，P＞0.05)之間ERCC1蛋白質(zhì)表達差異無統(tǒng)計學意義。
　　3、食管鱗狀細胞癌中ERCC1和Survivin蛋白質(zhì)表達有明顯相關(guān)性(r=0.40，P＜0.01)，ERCC1和Ki-6

6、7表達無明顯相關(guān)性(r=0.062，P＞0.05)。
　　4、Cox回歸模型多因素分析結(jié)果顯示放化療是影響手術(shù)切除的食管鱗狀細胞癌預后的獨立因素?；颊呓Y(jié)受放化療的相對危險度是0.379，95％可信區(qū)間:0.15-0.955，P＜0.05。ERCC1陰性表達患者平均生存期31個月，陽性表達患者平均生存期25個月，ERCC1并非獨立的預后因素（P＞0.05）。
　　結(jié)論:ERCC1、Survivin蛋白質(zhì)表達在食管鱗狀細胞癌發(fā)生

7、、發(fā)展過程中起重要作用。食管鱗癌組織的不同的分化程度、浸潤深度、腫瘤長度、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)之間ERCC1蛋白質(zhì)表達無明顯差異。ERCC1與Survivin在食管鱗狀細胞癌發(fā)生發(fā)展過程中可能存在協(xié)同作用。食管鱗狀細胞癌ERCC1蛋白質(zhì)表達與細胞增殖無明顯相關(guān)性。ERCC1并非手術(shù)切除的食管鱗狀細胞癌獨立的預后因素。
　　第二部分:ERCC1mRNA在食管鱗狀細胞癌中的表達及和Survivin、Ki-67表達的相關(guān)性研究

8、>　　目的:檢測食管鱗狀細胞癌組織中ERCC1、SurvivinmRNA表達，研究食管鱗狀細胞癌組織和癌旁正常食管粘膜ERCC1、SurvivinmRNA表達的差異，ERCC1mRNA表達與臨床病理特征的關(guān)系，ERCC1、SurvivinmRNA表達的相關(guān)性。
　　方法:收集72例食管鱗狀細胞癌患者術(shù)后腫瘤組織，取癌旁＞5cm正常食管粘膜組織72例作為對照，實驗組和對照組為配對樣本。所有患者術(shù)前未行放、化療，排除雙原發(fā)癌及遠處轉(zhuǎn)移

9、者，用實時熒光定量RT-PCR方法檢測ERCC1、SurvivinmRNA表達情況，分析食管鱗狀細胞癌和癌旁正常食管粘膜ERCC1mRNA表達的差異，食管鱗狀細胞癌和癌旁正常食管粘膜SurvivinmRNA表達的差異，ERCC1mRNA表達與食管鱗狀細胞癌組織的腫瘤細胞分化程度、腫瘤浸潤深度、腫瘤長度、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)之間的關(guān)系，ERCC1與SurvivinmRNA表達的相關(guān)性。
　　結(jié)果:
　　1、食管鱗狀細胞癌組

10、織中ERCC1mRNA表達高于癌旁正常食管粘膜組織，差異有顯著統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。SurvivinmRNA表達高于癌旁正常食管粘膜組織，差異有顯著統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。
　　2、食管鱗狀細胞癌組織的不同腫瘤細胞分化程度、腫瘤浸潤深度、腫瘤長度、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)之間ERCC1mRNA表達差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　3、食管鱗狀細胞癌中ERCC1和SurvivinmRNA表達有明顯相關(guān)性(r=0