染色質(zhì)重塑合物SWI-SNF核心亞單位SNF5調(diào)控多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞增殖的作用機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　觀察SWI/SNF核心亞單位SNF5對多發(fā)性骨髓瘤(MM)細(xì)胞增殖的影響，并探討其作用機(jī)制。
　　方法:
　　在多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞中建立四環(huán)素控制表達(dá)SNF5shRNA的穩(wěn)定細(xì)胞系，利用四環(huán)素誘導(dǎo)敲低SNF5，生長曲線評估細(xì)胞增殖，流式細(xì)胞術(shù)測定細(xì)胞周期，Transwell方法檢測細(xì)胞遷移的變化，采用Affimetrix芯片檢測基因表達(dá)譜，尋找介導(dǎo)細(xì)胞增殖或遷移相關(guān)的差異表達(dá)基因，并以RT-PCR和Weste

2、rnBlot證實(shí)，包括c-Myc，CyclinD1，AnnexinA2，CamKIIN1和CamKIID等，最后觀察高表達(dá)外源annexinA2是否可以減輕SNF5敲低引起的細(xì)胞增殖抑制效應(yīng)。
　　結(jié)果:
　　我們成功建立了可誘導(dǎo)的SNF5敲低的多發(fā)性骨髓瘤穩(wěn)定細(xì)胞系，SNF5敲低明顯抑制骨髓瘤細(xì)胞增殖，使細(xì)胞阻滯于G1期，并增強(qiáng)了細(xì)胞遷移能力;作為表觀遺傳關(guān)鍵調(diào)控因子，SNF5敲低引起廣泛基因表達(dá)譜變化，其中CyclinD