地塞米松抑制LPS和TNF-α誘導的人氣道平滑肌細胞IL-33表達.pdf

1、目的:
　　白介素33(IL-33)是最新發(fā)現(xiàn)的IL-1家族成員,是一個組織來源的細胞因子,主要位于核內。其受體為ST2,兩者結合可以介導Th2免疫反應,而Th2/Th1反應失衡在支氣管哮喘的發(fā)病中起重要作用。脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)是革蘭陰性桿菌的胞壁成分,能介導支氣管哮喘炎癥反應。LPS通過結合Toll樣受體4(TLR-4)參與免疫反應。近年的研究發(fā)現(xiàn)氣道平滑肌細胞(ASMC)同樣能夠參與炎癥反應

2、,且細胞表面可以表達TLR-4。這篇研究旨在對LPS能否刺激離體培養(yǎng)的人ASMC產生IL-33,作為難治性哮喘可能相關因子之一——TNF-α是否與LPS具有協(xié)同刺激作用以及糖皮質激素對IL-33生成的影響展開討論。
　　方法:
　　手術室收取因肺部疾病行肺段或肺葉切除的人支氣管標本(直徑0.5-1.0cm),原代培養(yǎng)支氣管平滑肌細胞,選取6-8代平滑肌細胞進行實驗。以每孔105cells/cm2種于六孔板中,分別或聯(lián)合加入各

3、刺激物LPS、TNF-α、哮喘致敏血清(AAS)、IgE。抑制實驗則將DXM、SB203580、PD98059等抑制物提前各刺激物30分鐘加入。相應時間點收集細胞上清行ELISA,收集細胞提取RNA行實時熒光定量PCR檢測。
　　結果:
　　LPS引起人氣道平滑肌細胞IL-33基因表達增高(p<0.05);哮喘致敏血清可能促進氣道平滑肌細胞IL-33產生,但這種效應與IgE作用關系不大(p>0.05);DXM抑制經LPS和T

4、NF-α誘導的IL-33mRNA生成(p<0.05);SB203580和PD98059部分抑制LPS和TNF-α誘導的IL-33生成。IL-33在細胞上清中的水平實驗組與對照組基本一致。
　　結論:
　　糖皮質激素能抑制多種細胞因子的生成而發(fā)揮抗炎作用。本實驗證明地塞米松能夠在體外抑制LPS和TNF-α誘導的IL-33基因表達,而p38MAPK和ERK通路抑制劑不能完全阻斷這種作用。目前糖皮質激素在哮喘控制和治療中仍然有重要