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文檔簡介
1、目的:探討新腫瘤相關(guān)基因cap43在胰腺癌細(xì)胞和組織中的表達(dá)情況,為胰腺癌早期診斷提供新的標(biāo)志物.材料和方法:人胰腺癌細(xì)胞株P(guān)aTu8988、SW1990和BX-PC3,正常內(nèi)皮細(xì)胞株EVM340為對(duì)照,細(xì)胞用含有15%小牛血清的DMEM培養(yǎng)液,在37℃、5%CO<,2>培養(yǎng)箱中體外培養(yǎng).組織標(biāo)本取自1999年4月~2002年8月第二軍醫(yī)大學(xué)附屬長海醫(yī)院普外科手術(shù)切除標(biāo)本33例.診斷由手術(shù)后病理證實(shí),所有病例均有較完整手術(shù)記錄及臨床資料
2、.其中胰腺癌和癌旁正常組織標(biāo)本33例,按腫瘤和癌旁正常組織配成33對(duì)進(jìn)行研究.男性22例,女性11例,年齡30~73歲,平均58.1歲.正常胰腺組織標(biāo)本1例,取自非胰腺疾病患者尸解標(biāo)本.以β-actin作為內(nèi)參照基因,采用半定量RT-PCR和Northern雜交的方法研究cap43基因在胰腺癌細(xì)胞系和組織中的表達(dá)情況.結(jié)論:cap43基因是最近新發(fā)現(xiàn)的腫瘤相關(guān)基因,在正常情況下不表達(dá)或低表達(dá),在細(xì)胞發(fā)生惡變的過程中,其表達(dá)顯著上調(diào),是肺
3、癌和腎細(xì)胞癌發(fā)生、發(fā)展的早期事件.我們的研究證實(shí)cap43在胰腺癌細(xì)胞系及組織中均上調(diào)表達(dá),且在胰腺癌早期就可檢測(cè)到,使其有可能成為胰腺癌早期診斷的標(biāo)志物之一,為胰腺癌基因檢測(cè)提供幫助.二、胰管細(xì)胞刷檢和胰液中VEGF檢測(cè)對(duì)胰腺癌早期診斷的價(jià)值.目的:探討胰管刷檢標(biāo)本細(xì)胞學(xué)檢測(cè)及聯(lián)合VEGF免疫組化檢測(cè)和采用ELISA法檢測(cè)胰液和血清中VEGF表達(dá)對(duì)胰腺癌的診斷價(jià)值.材料和方法:采用ERCP下胰管細(xì)胞刷獲取胰腺癌及慢性胰腺炎細(xì)胞學(xué)標(biāo)本以
4、及放置鼻胰管收集胰液標(biāo)本.1999年9月~2002年5月在第二軍醫(yī)大學(xué)附屬長海醫(yī)院消化內(nèi)科行ERCP及胰管刷檢的胰腺疾病患者68例,男47例,女21例,年齡20~92歲,平均58.9歲.其中胰腺癌52例,胰腺囊腺癌1例,胰腺囊腺瘤2例,十二指腸壺腹部腫瘤2例,慢性胰腺炎11例.胰腺癌組中胰頭癌36例,胰體尾癌16例,胰腺癌臨床分期參照1992年UICC分期,其中Ⅰ-Ⅱ期者13例,Ⅲ-Ⅳ者39例,包括病理確診和臨床診斷者,胰腺癌中13例有
5、病理診斷(包括原發(fā)灶或轉(zhuǎn)移灶穿刺活檢或手術(shù)證實(shí)),39例為臨床診斷胰腺癌.行ERCP及鼻胰管引流的胰腺疾病患者26例,其中胰腺癌15例、慢性胰腺炎11例.男性14例,女性12例,年齡22~75歲,平均58.7歲.同時(shí)采集患者空腹靜脈血,以健康成人空腹靜脈血為正常對(duì)照.采用胰管細(xì)胞刷檢細(xì)胞HEI雜色、免疫組化法檢測(cè)胰管刷檢標(biāo)本VEGF表達(dá)情況和ELISA法檢測(cè)胰液和血清中VEGF含量,探討內(nèi)鏡下胰液及胰管刷檢細(xì)胞中VEGF免疫組化檢測(cè)和胰
6、液中VEGF檢測(cè)對(duì)胰腺癌早期診斷及鑒別診斷的價(jià)值,篩選出最適合臨床應(yīng)用的胰腺癌早期診斷的方法.結(jié)論:ERCP下胰管細(xì)胞刷檢操作簡單、實(shí)用、并發(fā)癥少,刷檢所得細(xì)胞形態(tài)完整,診斷特異性高,但敏感性較低.聯(lián)合檢測(cè)胰管刷檢細(xì)胞學(xué)和VEGF表達(dá)可提高胰腺癌的診斷率及診斷準(zhǔn)確性,為一種診斷胰腺癌的有效輔助手段.此外,ERCP下放置鼻胰管引流出的胰液量充足,檢測(cè)胰液中VEGF含量可為早期診斷胰腺癌提供幫助,且該方法操作簡便,對(duì)臨床診斷胰腺癌應(yīng)用價(jià)值較
7、高.總結(jié):cap43基因在胰腺癌細(xì)胞株和胰腺癌組織中均呈顯著上調(diào)表達(dá).為胰腺癌發(fā)生、發(fā)展早期事件,檢測(cè)該基因可為早期診斷提供幫助.ERCP下胰管細(xì)胞刷檢操作簡單、實(shí)用、并發(fā)癥少,刷檢所得細(xì)胞形態(tài)完整,診斷特異性高、但敏感性較低.ERCP下放置鼻胰管收集胰液,方法簡單、安全可靠,引流出的胰液量充足,可用于分子生物學(xué)和免疫學(xué)研究.胰管細(xì)胞刷檢標(biāo)本可用于免疫組織化學(xué)檢測(cè),聯(lián)合胰管刷檢細(xì)胞學(xué)和刷檢細(xì)胞VEGF檢測(cè)顯著提高胰腺癌的診斷率,可作為一
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