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文檔簡介
1、現(xiàn)今社會,伴隨著經(jīng)濟的高速發(fā)展,環(huán)境污染問題日趨嚴(yán)峻,現(xiàn)已成為全球性廣泛關(guān)注的問題之一。環(huán)境污染對人類的健康水平有著非常重要的影響,目前我國針對環(huán)境污染物主要為外暴露水平的檢測。外暴露檢測是檢測環(huán)境樣品中(空氣、水源等)的污染物質(zhì),只能間接反映環(huán)境污染物在人類的暴露水平。由于人類不同的生活方式和遺傳因素,造成在同樣的環(huán)境下,體內(nèi)的環(huán)境污染物暴露水平有所不同,導(dǎo)致的健康危害風(fēng)險也存在差異,因此對環(huán)境污染物進行內(nèi)暴露水平的檢測具有更重要的意
2、義。內(nèi)暴露檢測是直接檢測人體生物體樣本中(血液、尿液、唾液等)的污染物質(zhì)的濃度,能夠直接顯示某一特定個體在特定的環(huán)境中的暴露水平,檢測得到的數(shù)據(jù)也可以用于環(huán)境污染物與疾病相關(guān)性的研究。
本文研究的沙丁胺醇(salbutamol,SAL)是β-興奮劑家庭的成員,可促進禽畜生長,減少脂肪沉積,提高禽畜瘦肉比率,常被不法養(yǎng)殖戶添加于動物飼料中。而沙丁胺醇化學(xué)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,易在動物組織臟器中殘留蓄積,進而對人類健康構(gòu)成潛在威脅,因此監(jiān)測沙
3、丁胺醇在人類體內(nèi)的殘留量顯得尤為重要。目前,檢測沙丁胺醇的色譜儀器分析方法,具有耗時長、成本高、樣本處理復(fù)雜、操作繁瑣等缺點,難以進行大批量檢測,而酶聯(lián)免疫檢測技術(shù)是基于抗原和抗體特異性結(jié)合的一種分析方法,具有特異性強,靈敏度高、通量高、檢測時間短、檢測成本低,操作簡單,樣本幾乎無前期處理等優(yōu)點,因此是環(huán)境污染物質(zhì)人體內(nèi)暴露檢測的最佳方法。雖然目前已經(jīng)有多種沙丁胺醇的ELISA檢測方法被建立并報道,但那些方法均是針對農(nóng)產(chǎn)品等外環(huán)境介質(zhì)中
4、沙丁胺醇的檢測而建立的,并不適用于人體樣本的檢測。
本研究針對沙丁胺醇這種常見的環(huán)境污染物,首先合成酶標(biāo)產(chǎn)物,經(jīng)過包被、競爭、顯色三步法,建立了以人體尿液為樣本的直接競爭ELISA檢測方法,運用該方法檢測環(huán)境污染物沙丁胺醇在人群中的含量,初步反映此種污染物質(zhì)在人群中的暴露水平及分布特征,建立相應(yīng)的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)庫,為環(huán)境污染物質(zhì)的人體內(nèi)暴露限值標(biāo)準(zhǔn)制訂及對疾病的相關(guān)性研究奠定基礎(chǔ)。
1.沙丁胺醇直接競爭ELISA檢測方法的
5、建立
目的:建立低成本、高準(zhǔn)確率的沙丁胺醇直接競爭ELISA檢測方法。方法:基于抗原抗體特異性原理,建立直接競爭ELISA檢測方法,制備標(biāo)準(zhǔn)曲線,并考察方法的精密度和回收率。結(jié)果:建立的沙丁胺醇直接競爭ELISA檢測方法的沙丁胺醇的半數(shù)抑制濃度為1.15 ng/mL,最低檢測限為0.01 ng/mL,回收率為86.2%-112.5%,變異系數(shù)為6.23%-11.52%。結(jié)論:本研究建立的方法操作簡單、特異性強、靈敏度高,可用于
6、大量樣本中環(huán)境污染物質(zhì)的檢測。
2.沙丁胺醇在人群中的內(nèi)暴露水平及相關(guān)性分析
目的:檢測沙丁胺醇在人群中的內(nèi)暴露水平,初步分析沙丁胺醇與人群健康狀況的相關(guān)性。方法:用本研究建立的沙丁胺醇直接競爭ELISA檢測方法,檢測人體尿液樣本中沙丁胺醇的濃度,采用SPSS17軟件對數(shù)據(jù)進行分析,并總結(jié)數(shù)據(jù)特點。結(jié)果:沙丁胺醇在1648例人體樣本中檢測,得到的沙丁胺醇的檢出率為96%,檢測范圍為LOD-30.83 ng/mL。沙丁
7、胺醇的幾何平均值,中值和90分位數(shù)分別為0.50ng/mL,0.73 ng/mL和3.85 ng/mL。沙丁胺醇的濃度在非妊娠婦女中明顯高于妊娠婦女(P<0.0001)。在年齡、性別和健康狀況無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論:沙丁胺醇在人群中有較高的檢出率,充分說明沙丁胺醇內(nèi)暴露檢測是非常必要的,但沙丁胺醇對人體的影響還有待研究。
綜上所述:
本研究對沙丁胺醇的人體內(nèi)暴露的檢測方法進行了探索,以抗原抗體特異性結(jié)合為基礎(chǔ),建立了靈敏
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