大豆異黃酮對大鼠下丘腦—垂體—脾臟ERα、NGF、IL-2、AR表達的影響.pdf

1、目的：本實驗研究了大豆異黃酮(SI)對去卵巢大鼠下丘腦-垂體-脾臟內雌激素受體-alpha(ERa)、神經生長因子(NGF)、白細胞介素-2(IL-2)、雄激素受體(AR)蛋白和mRNA表達及分布的影響，探討ERα、NGF、IL-2和AR在下丘腦、垂體、脾臟中表達的意義及大豆異黃酮對下丘腦-垂體-脾臟中四種物質的影響及其相互作用機制。并通過分離腸道內容物來研究大豆異黃酮對腸道菌群的影響。 方法：將50只雌性青年大鼠隨機分為假手術

2、組和去卵巢組，去卵巢組分別補充高、中、低、對照(溶劑)劑量大豆異黃酮，補充至2周和6周每組各宰殺5只，運用免疫組織化學SABC法和寡核苷酸探針原位組織雜交方法，對大鼠的下丘腦、垂體、脾臟中ERa、NGF、IL-2、AR的表達和分布變化進行研究，并運用活菌計數法對腸道內容物進行初步研究。 結果： ①ERα、NGF、IL-2、AR蛋白和mRNA分布于下丘腦的弓狀核、背內側核、腹內側核、室周核和室旁核，表明ERα、NGF、IL

3、-2、AR在下丘腦發(fā)揮了廣泛的作用，而四種產物主要定位于細胞胞核和突起，少量存在于胞漿和胞膜中，表明內源性雌激素主要通過經典的核受體途徑進行基因轉錄調控，也有部分通過非基因組機制。去卵巢大鼠下丘腦各核團中ERα、NGF、IL-2、AR的表達強度和陽性神經元數目總趨勢是顯著降低，而補充SI后四種陽性產物的強度和數目均得到不同程度的回升，其中6H(6周高劑量)組基本恢復到假手術組水平，6L(6周低劑量)組僅有少許回升，6M(6周中劑量)組介

4、于兩者之間，2周各劑量組中僅在2H(2周高劑量)組有回升，表明SI可提高體內雌激素水平，進而促進NGF、IL-2、AR的表達，在維持和保護下丘腦神經元的結構和功能中發(fā)揮了重要作用，而且這種作用存在時間和劑量的依賴性;另外ERα、NGF、IL-2、AR表達變化的相似性提示四者在SI對下丘腦的作用中是相互協(xié)調和聯(lián)系的。 ②ERα、NGF、IL-2、AR蛋白和mRNA在垂體前葉、中葉和后葉均有分布，且主要定位于胞核，胞膜和胞漿中很少，

5、表明ERα、NGF、IL-2、AR參與了垂體生理功能的發(fā)揮。去卵巢大鼠垂體中ERα、NGF、IL-2、AR的表達強度和陽性細胞數目均顯著下降，而且6C(6周去卵巢對照)組比2C(2周去卵巢對照)組下降更多。體外補充SI后，垂體ERα、NGF、IL-2、AR的表達強度和陽性細胞數目均有不同程度升高，其中6H組基本恢復至假手術組的水平，而2周各劑量組和6M、6L組僅有部分恢復或無明顯變化，且四者分布和強度的變化趨勢一致，表明SI在垂體結構和

6、功能維持上發(fā)揮了重要作用，且存在時間和劑量的依賴性，也表明SI在垂體中的作用是相互協(xié)調和影響的。 ③脾臟中廣泛分布著ERα、NGF、IL-2、AR蛋白，主要分布于被膜下方的紅髓區(qū)，而在白髓僅有極少量分布，mRNA分布區(qū)域與蛋白表達基本一致，僅在量上存在差異，即mRNA較蛋白表達多，表明ERα、NGF、IL-2、AR參與了脾臟免疫調節(jié)功能的發(fā)揮。去卵巢大鼠脾臟中ERα、NGF、IL-2、AR的表達強度和陽性細胞數目均顯著下降，而且

7、隨著去除卵巢時間的延長下降更多。體外補充高劑量SI6周后，脾臟ERα、NGF、IL-2、AR的表達強度和陽性細胞數目基本恢復至假手術組的水平，而2周各劑量組和6M、6L組僅有部分恢復或無明顯變化，表明SI通過。ERα對脾臟內NGF、IL-2、AR的表達有促進作用，且存在時間和劑量的依賴性；而四者分布和強度的變化趨勢一致，表明SI在脾臟中的作用是相互協(xié)調和聯(lián)系的。 ④ERα、NGF、IL-2、AR蛋白和mRNA在下丘腦、垂體、脾臟