大黃素影響大鼠胃平滑肌細胞鈣敏感性調節(jié)機制的研究.pdf

1、　　目的：研究大黃素對G蛋白偶聯(lián)的鈣敏感性調節(jié)影響的機制?！　》椒ǎ河妹阜纸夥ǚ蛛xWistar大鼠胃平滑肌細胞。采用平滑肌細胞內鈣鉗制技術使平滑肌細胞內的游離鈣離子水平控制在某一特定水平。先觀察大黃素是否通過G蛋白偶聯(lián)發(fā)揮作用，將實驗分四組：①大黃素組；②大黃素+GDP類似物GDPβs組；③GDP類似物GDPβs組；④正常對照組。各組均分五個濃度梯度，大黃素組為1，5，10，50，100μmol/L；GDPβs組為10，50，100，

2、500，1000μmol/L；大黃素+GDPβs組為前兩組濃度相應一一配伍而成。再觀察大黃素是否通過RhoA途徑發(fā)揮作用，將實驗分為兩組：加C3-transferase組和正常對照組。再用圖像分析系統(tǒng)測量平滑肌細胞的長度。采用Westernblotting分析大黃素引起RhoA在細胞內的蛋白表達量的變化。采用激光掃描共聚焦顯微鏡和免疫熒光技術分析RhoA在細胞內的時空分布變化?！　〗Y果：大黃素在平滑肌細胞內游離鈣離子水平固定時劑量依賴