硫酸鋅對(duì)高脂喂養(yǎng)ApoE基因敲除小鼠保護(hù)作用研究.pdf

1、目的和意義：
　　 動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）是一種多因素疾病，涉及基因、環(huán)境、代謝等諸多因素。近年研究顯示，氧化應(yīng)激是動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展的重要因素，貫穿于動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成、發(fā)展以及破裂并觸發(fā)臨床事件的始終。此外，脂質(zhì)代謝紊亂被認(rèn)為與動(dòng)脈粥樣硬化關(guān)系緊密，其中高脂血癥被認(rèn)為是動(dòng)脈粥樣硬化的主要危險(xiǎn)因素之一；而且高脂喂養(yǎng)通過增強(qiáng)自由基產(chǎn)生的線粒體呼吸鏈增加了可獲得的氧化底物和自由基的數(shù)量。鋅(zi

2、nc，Zn)是廣泛存在于人體內(nèi)的一種必需微量元素，它具有抗氧化作用，在清除氧自由基過程中發(fā)揮重要作用。本實(shí)驗(yàn)通過低劑量長期補(bǔ)充鋅的方式對(duì)高脂喂養(yǎng)的ApoE基因敲除小鼠進(jìn)行干預(yù)，探討通過補(bǔ)充微量元素的方式對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物心臟的保護(hù)作用及相關(guān)機(jī)制，以及對(duì)肝臟的損傷影響及肝臟中脂代謝調(diào)節(jié)情況。為日常合理補(bǔ)鋅預(yù)防和降低動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病及干預(yù)疾病進(jìn)展提供依據(jù)，對(duì)于降低我國心血管疾病的發(fā)病率具有重大的社會(huì)價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義。
　　 研究方法：

3、>　　 將30只清潔級(jí)雄性純合子載脂蛋白E(AopE)基因敲除小鼠隨機(jī)分為高脂模型組、低劑量組、高劑量組，每組10只；并以10只C57BL/6J小鼠作為對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)期間，全部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼以“西方類型”膳食，除對(duì)照組和高脂模型組自由飲用去離子水外，低劑量組和高劑量組分別連續(xù)14周自由飲用濃度為2.5mmol/L和25mmol/L的硫酸鋅水溶液。小鼠處死后測定全血和股骨中鋅和鐵含量；檢測心臟組織中SOD、T-AOC和MDA水平，以及血脂水平

4、和心臟組織中MTmRNA水平；蘇木素-伊紅染色觀察動(dòng)脈中動(dòng)脈粥樣硬化斑塊情況。檢測肝臟組織的中SOD、T-AOC和MDA水平，以及血清中AST、ALT水平；蘇木素-伊紅染色觀察肝臟組織中脂肪蓄積的情況。
　　 結(jié)果：
　　 1.低劑量和高劑量補(bǔ)鋅實(shí)驗(yàn)組小鼠全血中鋅含量分別為（5.15±0.36）mg/L和（5.11±0.44）mg/L，明顯高于其它兩組(P＜0.05)；并且補(bǔ)鋅組股骨鋅也明顯增加(P＜0.05)；但沒有明

5、顯改變?nèi)凸晒侵需F的含量(P＞0.05)。
　　 2.補(bǔ)鋅后低劑量組和高劑量組心臟組織中T-AOC和SOD水平明顯增加（P＜0.05），而MDA水平明顯降低（P＞0.05）。
　　 3.低劑量組和高劑量組小鼠血清中甘油三酯明顯低于高脂模型組(P＜0.05)，但對(duì)血清中總膽固醇、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白沒有明顯的影響。
　　 4.高劑量組小鼠心臟組織中MTmRNA水平明顯高于其它兩組(P＜0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)

6、學(xué)意義。
　　 5.加鋅組冠狀動(dòng)脈蘇木素-伊紅染色，低劑量組冠狀動(dòng)脈中動(dòng)脈粥樣硬化斑塊明顯小于高脂模型組。
　　 6.補(bǔ)充鋅后血清中ALT和AST水平明顯低于其它兩組（P＜0.05），但蘇木素一伊紅染色觀察發(fā)現(xiàn)補(bǔ)鋅不能明顯改善肝臟細(xì)胞內(nèi)脂肪蓄積。
　　 結(jié)論：
　　 1.補(bǔ)充鋅對(duì)高脂喂養(yǎng)造成ApoE基因敲除小鼠心臟的氧化損傷具有明顯保護(hù)作用，這可能是通過鋅在體內(nèi)誘導(dǎo)的金屬硫蛋白完成的。
　　 2.

7、補(bǔ)充鋅能調(diào)節(jié)甘油三酯代謝并能減緩動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成。
　　 3.補(bǔ)鋅對(duì)高脂造成的肝臟脂肪蓄積沒有明顯的調(diào)節(jié)作用。
　　 創(chuàng)新點(diǎn)：
　　 1.有研究顯示氧化應(yīng)激是動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的危險(xiǎn)因素，必需微量元素鋅具有抗氧化作用可以改善實(shí)驗(yàn)動(dòng)物兔的動(dòng)脈粥樣硬化，我們首次利用硫酸鋅對(duì)ApoE基因敲除小鼠這種成熟動(dòng)脈粥樣硬化模型進(jìn)行干預(yù)，并探討長期低劑量補(bǔ)鋅對(duì)心臟的保護(hù)作用及對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成和發(fā)展的影響，具有積極的理論