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文檔簡介
1、目的:通過觀察商陸皂苷甲(EsA)對IL-1β誘導的大鼠腎小球系膜細胞(rGMC)增殖與凋亡及CDK2、P27和Caspase-3表達的影響,探討EsA治療狼瘡性腎炎(LN)等系膜細胞增殖性腎小球疾病的可能機制。
方法:①用MTT法檢測不同濃度的EsA(0.625mg/L,1.25mg/L,2.5mg/L,5.0mg/L,10mg/L,20mg/L)對rGMC增殖與毒性的影響,同時設立對照組(不加藥物干預);②將rGMC分為正
2、常對照組,IL-1β組,IL-1β+EsA組,同步化后培養(yǎng)48h,分別用PI(含Rnase)染色法流式細胞儀檢測細胞周期的影響,AnnexinV/FITC,PI染色法流式細胞儀檢測細胞凋亡率;③WestemBlot法檢測CDK2,P27,Caspase-3的表達,并成像分析。
結果:①觀察濃度的EsA對rGMC沒有明顯的細胞毒作用;作用48h后,EsA對rGMC增殖影響濃度是2.5-5.0mg/L(P<0.05或P<0.01)
3、;②流式細胞儀檢測結果示:與正常對照組比較,IL-1β組促進了rGMC增殖(P<0.01),同時表現(xiàn)了細胞凋亡(P<0.01);與IL-1β組比較,IL-1β+EsA組抑制了細胞增殖(p<0.05),對細胞凋亡的影響無明顯差異(p>0.05);③WestemBlot檢測結果示:與正常對照組比較,IL-1β組rGMC的CDK2,Caspase-3的表達均明顯增強(P<0.01),P27的表達明顯下降(P<0.01);與IL-1β組比較,I
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