抗人血小板P-選擇素單克隆抗體（SZ-51）的應(yīng)用研究.pdf

1、P-選擇素(P-selectin)存在于血小板a顆粒膜表面和血管內(nèi)皮細(xì)胞Weibel-Palade小體內(nèi),當(dāng)血小板或內(nèi)皮細(xì)胞受刺激活化時,胞漿內(nèi)的α顆粒或Weibel-Palade小體與細(xì)胞膜融合,因此細(xì)胞膜表面P-Selectin表達量的增加可作為血小板和內(nèi)皮細(xì)胞活化的特異性標(biāo)志.為了用單克隆抗體親和層析方法從人血小板破碎液中純化血小板P-選擇素,將單克隆抗體SZ-51-IgG與溴化氰活化的Sepharose4B凝膠連接成SZ-51-

2、IgG-Sepharose4B親和層析柱,人血小板破碎液經(jīng)此親和層析柱上樣后,再經(jīng)FPLC系統(tǒng)獲得所要的產(chǎn)品.為了探討各種血栓形成相關(guān)性疾病患者的P-選擇素的表達變化及其臨床意義.應(yīng)用FITC標(biāo)記抗P-選擇素單抗SZ-51-IgG和FCM分析了42例糖尿病患者、33例高血脂患者、23例腦梗塞患者和20例正常人的血小板膜P-選擇素表達,并與間接FCM和ELISA法進行了比較.為了探討H<,2>O<,2>刺激臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)P-

3、selectin的表達及阿魏酸對其表達的影響作用.應(yīng)用HUVEC體外培養(yǎng),經(jīng)H<,2>O<,2>刺激后,用FITC標(biāo)記抗P-選擇素單抗SZ-51-IgG和FCM測定HUVEC表面表達的P-selectin,同時觀察了阿魏酸對其表達的影響和觀察了SZ-51對固相化P-selectin介導(dǎo)的PMN粘附的影響.結(jié)果顯示正常培養(yǎng)的HUVEC表面表達少量的P-selectin,用較低H<,2>O<,2>濃度就能刺激培養(yǎng)的HEVEC表面表達較高的P