消炎鎮(zhèn)痛液不同途徑伍用牛痘疫苗致炎兔皮提取物對大鼠坐骨神經損傷修復的作用.pdf

1、目的：周圍神經損傷尤其是慢性卡壓所致的坐骨神經損傷是臨床上的常見病，其功能恢復的程度直接影響著病人生活的質量，因此如何促進受損神經的再生與修復一直是臨床研究的重要課題。影響神經再生與修復的因素很多，其中損傷處的微環(huán)境是最主要的影響因素。一直以來常用的消炎鎮(zhèn)痛液對微環(huán)境起著重要的調節(jié)作用，目前隨著牛痘疫苗致炎兔皮提取物注射液（Extract from Rabbit Skin lnflamed by Vaccinia V irus for

2、lnjection，ERSVV）越來越多的用于神經修復的治療，其給藥途徑從肌肉注射、靜脈輸注到腹腔神經叢、蛛網膜下腔也在不斷拓寬。本實驗采用SD大鼠，參照Bennett and Xie設計的坐骨神經慢性卡壓模型，探討消炎鎮(zhèn)痛液伍用ERSVV，ERSVV于受損神經周圍直接給藥對神經修復的作用是否優(yōu)于肌肉注射。旨在為臨床治療提供依據。
　　 方法：雄性SD大鼠80只，體重280+20克，隨機分為4組，每組20只：A組為假手術組（正常

3、對照組），B組為模型組（卡壓對照組），C組為神經周圍給予消炎鎮(zhèn)痛液，肌肉注ERSVV，D組為神經周圍給予消炎鎮(zhèn)痛液和ERSW。用10％水合氯醛300mg/kg腹腔注射麻醉后，大鼠左側臥位于操作臺上，股部去毛，在無菌操作下暴露右下肢坐骨神經。A組僅暴露神經而不進行結扎處理，即縫合切口；B、C、D三組行CCI造模。選擇坐骨神經分成三支前的1cm主干部位，以4/0鉻制羊腸線松扎四道，每道間隔1mm，打結松緊以肢體輕微抽動為宜，并在神經管旁置管

4、縫合切口。對側下肢肌注慶大霉素（0.2ml，10mg/ml）預防感染。各組每天經導管注射注射用水0.2ml，防止導管阻塞。造模后14天大鼠行為反應最強烈更易激惹，取材后鏡下觀察到神經水腫、軸突變性、數目減少、髓鞘崩解（Guilband報道該模型建立需要14天）證明CCI模型制備成功。B組14天后繼續(xù)經導管注射注射用水0.2ml直至取材.C、D兩組在14天通過所置的管注射消炎鎮(zhèn)痛液（5mg/ml復方倍他米松0.05ml+2％利多卡因0.0

5、5ml+0.5mg/ml維生素B120.05ml+滅菌用水0.05ml）.從第15天始，C組每天注射混合液0.2 ml（注射用水0.1ml+2％利多卡因0.05ml+0.5mg/ml維生素B120.05ml），同時肌肉注射ERSVV0.1ml。D組是將ERSVV0.1ml加在混合液中替代注射用水，直到取材。四組分別于CCI術后第14天、21天、28天測坐骨神經功能指數（Sciatic functional index，SFI）；并且在各

6、組中隨機取7只大鼠，麻醉下暴露坐骨神經，觀察神經的大體變化；測量神經傳導速度（nerve conduction velocity，NCV）及振幅（Amplitude，APT）并取材；在光鏡和電鏡下觀察坐骨神經的超微結構、作圖樣分析計算神經軸突數目和髓鞘厚度；用免疫組化法觀察神經生長因子（Nerve growth factor，NGF）的數目變化。
　　 結果：
　　 1.SFI A組約為-0.2各時間點無明顯變化。B組維

7、持在-33左右。C、D組第21天均高于B組而低于A組：第28天C組明顯大于B組（P<0.05）；D組大于B組非常顯著（P<0.01）；D組明顯大于C組（P<0.05）；組內比較C、D兩組28天時明顯優(yōu)于21天時（P<0.05），優(yōu)于14天時更為明顯（P<0.05）。
　　 2.NCV與AMP與A組比，B、C、D三組第21天降低非常顯著（P<0.01）；第28天明顯降低（P<0.05）。21、28天C、D兩組均高于B組（P<0.0

8、5）；D組明顯高于C組（P<0.05）；C、D兩組分別與28天、14天時進行組內比較升高非常顯著（P<0.05；P<0.01）。
　　 3.軸突計數和髓鞘厚度C、D組第21、28天均大于B組低于A組；D組明顯大于C組（P<0.05）； C、D兩組分別與28天、14天時進行組內比較升高非常顯著（P<0.05；P<0.01）。
　　 4.免疫組織化學 A組的NGF不表達或少量表達。B、C、D、E組在變性及再生神經纖維的軸索和

9、雪旺細胞（SC）的胞膜均有一定數量的表達。圖像分析結果顯示：損傷處神經的平均灰度指數：組內比，B、C、D三組28天均大于21天和14天；但B組無統計學意義；21、28天時C、 D兩組均大于B組（P<0.05；P<0.01），D組大于C組（P<0.05）。
　　 5.大體及組織病理學觀察大體觀察 A組神經光滑，與周圍組織無粘連。造模后14天，B、C、D各組坐骨神經明顯充血、水腫、增粗，外膜顏色較紅。21、28天B組減輕不明顯，C、

10、D組充血、水腫明顯減輕，外膜的顏色較14天時變白。D組充血、水腫明顯輕于C組。光鏡下觀察A組神經纖維排列整齊，髓鞘完好。第14天時B、C、D組神經纖維排列紊亂，髓鞘脫落神經水腫嚴重，神經軸突密度減少，可見大量的脫落髓鞘。在28天時B組神經纖維的排列和軸突數目有所增多，但與C、D兩組同時間比較有明顯差異。C、D組的神經纖維排列較整齊，方向性較好，雪旺細胞增殖明顯，神經纖維生長較好，而D組明顯優(yōu)于C組，鏡下可見髓鞘變厚、軸突數量增多。上述神

11、經修復情況28天C、D兩組明顯好于21天。電鏡下觀察在第14天時，A組神經完整，結構規(guī)則；第28天時B組軸突部分斷裂，脊膜消失融合，微絲微管減少。C組大部分脊膜消失融合，可見微絲微管，損傷較輕，髓鞘變厚，板層變規(guī)則，但D組有髓神經纖維的數量、軸突直徑、髓鞘厚度、軸突內線粒體、微絲、微管、數量等均大于D組。C、D兩組修復情況均明顯好于21天時。
　　 結論：1.消炎鎮(zhèn)痛液伍用ERSVV有利于損傷神經的修復。2.ERSVV神經周圍給