2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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1、目的: 自噬是廣泛存在于真核細(xì)胞內(nèi)的一種生理現(xiàn)象,細(xì)胞在饑餓狀態(tài)下,會(huì)消化自己體內(nèi)的細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞器來度過難關(guān),也稱之為“細(xì)胞自噬”。創(chuàng)傷后機(jī)體處于高代謝低合成狀態(tài),出現(xiàn)機(jī)體能量不足;而細(xì)胞在饑餓狀態(tài)下自噬作用明顯增強(qiáng),自噬體增加,進(jìn)而勢(shì)必影響機(jī)體機(jī)能的改變,最終對(duì)創(chuàng)傷患者的預(yù)后產(chǎn)生影響。因此本課題旨在通過研究單核細(xì)胞的自噬水平的變化及其與創(chuàng)傷程度、創(chuàng)傷后糖代謝和預(yù)后之間的關(guān)系,闡明創(chuàng)傷后外周血單核細(xì)胞自噬水平的變化規(guī)律,從而為創(chuàng)

2、傷患者的臨床治療提供新的思路和線索。 方法: 1.根據(jù)損傷嚴(yán)重度評(píng)分(injury severity score,ISS)或簡(jiǎn)明損傷定級(jí)標(biāo)準(zhǔn)(abbreviated injury scale,AIS)將創(chuàng)傷患者分為輕傷組、重傷組、嚴(yán)重傷組,輕傷組(多發(fā)傷ISS<16,或部位傷AIS=1~2)、重傷組(16≤ISS<25,或AIS=3)、嚴(yán)重傷組(ISS>25,或AIS≥4),同時(shí)設(shè)立健康對(duì)照組,分別于創(chuàng)傷后24 h、3d

3、、Sd、10 d采集外周血,采用密度梯度離心結(jié)合貼壁分離法分離創(chuàng)傷患者外周血單核細(xì)胞,應(yīng)用激光共聚焦顯微鏡和透射電鏡觀察細(xì)胞自噬現(xiàn)象。 2.將分離得到的單核細(xì)胞進(jìn)行丹(磺)酰戊二胺(monodansylcadaverin,MDC,自噬體的特異染色劑)染色并裂解,應(yīng)用熒光分光光度計(jì)(激發(fā)光波長(zhǎng)380nm、發(fā)射光波長(zhǎng)525nm)測(cè)定熒光強(qiáng)度進(jìn)行定量分析。 3.于創(chuàng)傷后24h、3d、Sd檢測(cè)患者血糖水平,分析創(chuàng)傷后外周血單核細(xì)

4、胞自噬變化與血糖的相關(guān)性。 4.記錄入組創(chuàng)傷患者的感染并發(fā)癥等結(jié)局,分析創(chuàng)傷后外周血單核細(xì)胞自噬變化與預(yù)后的相關(guān)性。 結(jié)果: 1.本實(shí)驗(yàn)的透射電鏡觀察結(jié)果從形態(tài)學(xué)上證實(shí)了創(chuàng)傷患者外周血單核細(xì)胞自噬現(xiàn)象的存在,表現(xiàn)為雙層膜結(jié)構(gòu)的自噬體位于細(xì)胞核旁,呈圓形或橢圓形,其內(nèi)包含細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞器。 2.在激光共聚焦顯微鏡觀察下,創(chuàng)傷患者外周血單核細(xì)胞的熒光顆粒(染色的自噬小體)明顯比正常對(duì)照組增多,且隨著創(chuàng)傷程度的加

5、重,熒光顆粒越多,著色也隨之加深。 3.與正常對(duì)照組比較,創(chuàng)傷患者外周血單核細(xì)胞MDC染色后OD值(反映自噬水平)明顯升高:輕傷組,單核細(xì)胞自噬水平在第5d達(dá)到高峰;重傷組,單核細(xì)胞自噬水平在第3d達(dá)到高峰;嚴(yán)重傷組,單核細(xì)胞自噬水平在創(chuàng)傷后24h內(nèi)達(dá)到高峰,有顯著性差異(P<0.05)。 4.與正常對(duì)照組比較,創(chuàng)傷后血糖升高,表現(xiàn)為創(chuàng)傷后高糖血癥。對(duì)外周血單核細(xì)胞自噬水平和創(chuàng)傷后血糖做散點(diǎn)圖及相關(guān)分析,發(fā)現(xiàn)創(chuàng)傷后高糖血

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