天然牛磺酸對肝內(nèi)型門脈高壓大鼠門靜脈組織結(jié)構(gòu)及力學(xué)特性的調(diào)控.pdf

1、目的:觀察天然?；撬釋Ω蝺?nèi)型門脈高壓大鼠血液動力學(xué)指標、門靜脈組織結(jié)構(gòu)及力學(xué)特性的調(diào)控,為進一步探索門脈高壓病理機制及新的臨床治療途徑提供實驗依據(jù)。
　　方法:140只健康清潔SD大鼠,雄性,體重(170±25)g,隨機分成正常對照組20只、造模組120只。采用復(fù)合因素法制備肝硬化門脈高壓癥大鼠模型,造模10周后隨機抽5只大鼠行血流動力學(xué)及肝臟病理組織學(xué)檢測,確定肝硬化門脈高壓癥模型制備成功后,將造模組大鼠重新隨機分為模型組和天然

2、?；撬岬蛣┝俊⒅袆┝?、高劑量治療組,每組各27只,治療組大鼠按天然牛磺酸低、中、高(0.3g、0.6g、1.2g/kg?d)劑量灌胃,每天一次,連續(xù)60天,直至實驗結(jié)束,模型組及對照組大鼠給與相同劑量生理鹽水灌胃。取大鼠門靜脈主干,行 HE(Haematoxylin Eosin, HE)染色后,計算機圖文分析軟件分別測量門靜脈內(nèi)經(jīng)(Internal Diameter,ID)、外徑(Outside Diameter,OD)、壁厚(Wall

3、 Thickness,WT)及壁面積(Cross-Sectional Area,CSA);透射電鏡( Transmission Electro Microscope,TEM)下觀察門靜脈內(nèi)皮細胞、平滑肌細胞等超微結(jié)構(gòu);采用生物力學(xué)技術(shù)測定門脈高壓癥大鼠門靜脈縱向拉伸應(yīng)力-應(yīng)變曲線及殘余應(yīng)力大小。
　　結(jié)果:(1)血液動力學(xué)改變:模型組大鼠門靜脈血流量(Portal Vein Flow,PVF)、門靜脈壓力(Portal Venou

4、s Pressure,PVP)及門靜脈阻力(Portal Vein Resistance,PVR)均顯著增加,與對照組相比差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),門靜脈高壓癥大鼠模型制作成功;天然牛磺酸低、中、高劑量組門靜脈PVF、PVP、PVR顯著降低,與模型組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),尤以中、高劑量組差異非常顯著(P<0.01)。(2)門靜脈管壁結(jié)構(gòu)改變:模型組門靜脈ID、OD、WT及CSA均顯著增加,與對照組相比差異均有統(tǒng)

5、計學(xué)意義(P<0.01);天然牛磺酸低、中、高劑量組門靜脈ID、OD、WT和CSA顯著減少,與模型組相比差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),各治療組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。(3)透射電鏡觀察結(jié)果:對照組大鼠門靜脈內(nèi)皮細胞結(jié)構(gòu)正常,胞核清晰,基底膜完整;模型組門靜脈內(nèi)皮細胞不同程度變性,部分內(nèi)皮細胞分布不規(guī)則,呈現(xiàn)脫落現(xiàn)象,基底膜完整性遭到破壞,連接松散,平滑肌細胞轉(zhuǎn)型或增生肥大,線粒體腫脹甚至空泡化;經(jīng)天然牛磺酸低劑量治療

6、后,門靜脈內(nèi)皮細胞無變性和脫落,基底膜仍較厚,平滑肌細胞無肥大增生;天然?；撬嶂?、高劑量組大鼠門靜脈內(nèi)皮細胞無變性和脫落,基底膜連接完整,平滑肌細胞未見肥大增生。(4)門靜脈生物力學(xué)改變:①正常組大鼠門靜脈在拉伸實驗中,應(yīng)變達50％時應(yīng)力為0.55N,此時應(yīng)力-應(yīng)變曲線較平坦,門靜脈拉伸應(yīng)變從50％到試樣斷裂過程中,應(yīng)力-應(yīng)變曲線較前陡峭,應(yīng)力達1.47N,應(yīng)變?yōu)?6.67％時試樣斷裂;模型組大鼠門靜脈以同樣速率拉伸,應(yīng)力-應(yīng)變曲線始終

7、陡峭,門靜脈拉伸應(yīng)變達50％時應(yīng)力為1.09N,當應(yīng)力達到1.51N、應(yīng)變?yōu)?5.67％時門靜脈斷裂,試樣拉伸應(yīng)變耗時較正常組短,在同等應(yīng)變條件下,門脈高壓組的應(yīng)力顯著高于正常組(P<0.01)。天然牛磺酸低劑量組門靜脈在拉伸過程中,試樣應(yīng)力-應(yīng)變曲線稍陡峭,拉伸應(yīng)變耗時較正常組短,與模型組比較差異不顯著(P>0.05));天然?；撬嶂?、高劑量組大鼠門靜脈在拉伸過程中,應(yīng)力-應(yīng)變曲線均較平坦,試樣拉伸應(yīng)變耗時較模型組顯著增加(P<0.0

8、1),與正常組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。②正常大鼠門靜脈張開角呈小“c”形,角度約80°左右,組內(nèi)波動范圍小;模型組試樣切開后張開角呈大“C”形,角度在98.7°至124.9°之間,組內(nèi)波動幅度較大(VS正常組,P<0.01);天然?；撬嶂?、高劑量組門靜脈張開角84°左右,張開角的大小及組內(nèi)波動范圍較模型組均顯著變小(P<0.01);天然?；撬岬蛣┝拷M門靜脈張開角減小幅度不明顯,張開角波動在94°至120°,與模型組比較差異

9、無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　結(jié)論:(1)肝內(nèi)型門脈高壓大鼠門脈系統(tǒng)處于高阻力、高壓力、高血流量的全身高動力循環(huán)狀態(tài)。(2)肝內(nèi)型門脈高壓大鼠門靜脈組織結(jié)構(gòu)及生物力學(xué)特性發(fā)生了顯著改變:①門靜脈管壁增厚,內(nèi)外管徑增大,順應(yīng)性下降;②門靜脈內(nèi)皮細胞遭破壞,平滑肌細胞增殖及轉(zhuǎn)型;③門靜脈處于周向和軸向的高應(yīng)力狀態(tài)。(3)天然牛磺酸通過改善門靜脈組織結(jié)構(gòu)及生物力學(xué)的平衡一定程度上抑制門脈高壓癥,具體表現(xiàn)為:顯著改善全身高動力循環(huán)狀