血清-血漿中miR-21與食管癌關(guān)系的病例對(duì)照研究.pdf

1、背景與目的:食管癌是世界上最常見的八大惡性腫瘤之一,我國(guó)食管癌發(fā)病率和死亡率位居世界之冠。食管癌就診時(shí)多處于中晚期,相當(dāng)部分的病人已不能手術(shù)治療,總的五年生存率很低,但是早期食管癌手術(shù)10年生存率可達(dá)95.00％。因此提高食管癌早期診斷率以便進(jìn)行二級(jí)預(yù)防,十分必要。目前較常用的診斷方法是食管功能檢查、影像學(xué)檢查、食管脫落細(xì)胞學(xué)檢查和食管鏡檢查,但會(huì)給患者造成較大的傷害和痛苦,且敏感性較差。在過(guò)去對(duì)miRNA的研究中,發(fā)現(xiàn)miRNA能夠成

2、為腫瘤的一種新的補(bǔ)充生物標(biāo)志物,而目前研究較多的血清/血漿miRNA則可能給腫瘤診斷提供了一個(gè)新的選擇。miR-21作為一個(gè)重要的miRNA,在多種腫瘤細(xì)胞中異常表達(dá),參與了細(xì)胞的分化、增殖和凋亡,與腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),對(duì)于腫瘤的診斷、治療和預(yù)后,具有重要的臨床意義。然而,就目前文獻(xiàn)報(bào)道來(lái)看,沒(méi)有發(fā)現(xiàn)血清/血漿中miR-21與食管癌相關(guān)性的研究,本論文旨在揭示食管癌患者血清/血漿中miR-21的表達(dá)情況,評(píng)估血清/血漿中miR-21表

3、達(dá)水平作為一個(gè)新的食管癌生物標(biāo)志物的價(jià)值。
　　方法:血液標(biāo)本由汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科收集,冰盒送運(yùn),-80℃超低溫冰箱保存。Trizol法提取22例食管鱗癌患者的血清/血漿及22例正常體檢者血清/血漿總RNA,以及5例手術(shù)患者術(shù)前術(shù)后的血清/血漿總RNA,運(yùn)用紫外分光光度儀和凝膠成像系統(tǒng)對(duì)所提總RNA的純度和完整性進(jìn)行分析。設(shè)計(jì)miR-21和內(nèi)參照U6的莖環(huán)結(jié)構(gòu)反轉(zhuǎn)錄引物和PCR擴(kuò)增引物,利用SYBR Green實(shí)時(shí)熒

4、光定量PCR法檢測(cè)miR-21及內(nèi)參照U6的表達(dá)水平。運(yùn)用spss17.0對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。
　　結(jié)果:SYBR Green實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)得到的U6和miR-21熔解曲線單一,PCR產(chǎn)物特異。22例正常體檢者組血清/血漿miR-21的表達(dá)水平是食管鱗癌患者的1.70倍,但是兩者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。5例手術(shù)患者術(shù)后血清/血漿miR-21的表達(dá)水平是術(shù)前的4.56倍(P<0.05)。食管癌血清/血漿miR-21

5、的表達(dá)水平與性別、年齡、癌發(fā)部位、分化程度、分期、轉(zhuǎn)移類型、有無(wú)放化療無(wú)相關(guān)性(P>0.05),但與有無(wú)手術(shù)、是否轉(zhuǎn)移相關(guān)(P<0.05)。
　　結(jié)論:食管癌患者血清/血漿中的miR-21表達(dá)水平低于正常體檢者,但差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;食管癌患者血清/血漿miR-21的表達(dá)水平與有無(wú)手術(shù)、是否轉(zhuǎn)移相關(guān);血清/血漿中的miRNA具有較高的穩(wěn)定性,檢驗(yàn)剩余血能夠很好的用于血清/血漿中miRNAs表達(dá)水平研究;檢測(cè)患者血清/血漿miR-21