血清-血漿中miR-21與食管癌關系的病例對照研究.pdf

1、背景與目的:食管癌是世界上最常見的八大惡性腫瘤之一,我國食管癌發(fā)病率和死亡率位居世界之冠。食管癌就診時多處于中晚期,相當部分的病人已不能手術治療,總的五年生存率很低,但是早期食管癌手術10年生存率可達95.00％。因此提高食管癌早期診斷率以便進行二級預防,十分必要。目前較常用的診斷方法是食管功能檢查、影像學檢查、食管脫落細胞學檢查和食管鏡檢查,但會給患者造成較大的傷害和痛苦,且敏感性較差。在過去對miRNA的研究中,發(fā)現miRNA能夠成

2、為腫瘤的一種新的補充生物標志物,而目前研究較多的血清/血漿miRNA則可能給腫瘤診斷提供了一個新的選擇。miR-21作為一個重要的miRNA,在多種腫瘤細胞中異常表達,參與了細胞的分化、增殖和凋亡,與腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關,對于腫瘤的診斷、治療和預后,具有重要的臨床意義。然而,就目前文獻報道來看,沒有發(fā)現血清/血漿中miR-21與食管癌相關性的研究,本論文旨在揭示食管癌患者血清/血漿中miR-21的表達情況,評估血清/血漿中miR-21表

3、達水平作為一個新的食管癌生物標志物的價值。
　　方法:血液標本由汕頭大學醫(yī)學院附屬第一醫(yī)院檢驗科收集,冰盒送運,-80℃超低溫冰箱保存。Trizol法提取22例食管鱗癌患者的血清/血漿及22例正常體檢者血清/血漿總RNA,以及5例手術患者術前術后的血清/血漿總RNA,運用紫外分光光度儀和凝膠成像系統(tǒng)對所提總RNA的純度和完整性進行分析。設計miR-21和內參照U6的莖環(huán)結構反轉錄引物和PCR擴增引物,利用SYBR Green實時熒

4、光定量PCR法檢測miR-21及內參照U6的表達水平。運用spss17.0對所得數據進行分析。
　　結果:SYBR Green實時熒光定量PCR檢測得到的U6和miR-21熔解曲線單一,PCR產物特異。22例正常體檢者組血清/血漿miR-21的表達水平是食管鱗癌患者的1.70倍,但是兩者差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。5例手術患者術后血清/血漿miR-21的表達水平是術前的4.56倍(P<0.05)。食管癌血清/血漿miR-21

5、的表達水平與性別、年齡、癌發(fā)部位、分化程度、分期、轉移類型、有無放化療無相關性(P>0.05),但與有無手術、是否轉移相關(P<0.05)。
　　結論:食管癌患者血清/血漿中的miR-21表達水平低于正常體檢者,但差別無統(tǒng)計學意義;食管癌患者血清/血漿miR-21的表達水平與有無手術、是否轉移相關;血清/血漿中的miRNA具有較高的穩(wěn)定性,檢驗剩余血能夠很好的用于血清/血漿中miRNAs表達水平研究;檢測患者血清/血漿miR-21