系統(tǒng)性紅斑狼瘡CD4+T細(xì)胞microRNA表達(dá)譜研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
　　 通過檢測系統(tǒng)性紅斑狼瘡(Systemic lupus erythematosus,SLE)患者CD4+T細(xì)胞microRNA(miRNA)表達(dá)水平,為揭示miRNA在SLE發(fā)生、發(fā)展中的作用奠定基礎(chǔ)。
　　 方法:
　　 1.密度梯度離心分離正常人、SLE患者的外周血單個核細(xì)胞,磁珠分離CD4+T細(xì)胞；
　　 2.試劑盒提取miRNA和總蛋白；
　　 3.miRNA微陣列芯片(mic

2、roarry)高通量檢測miRNA在正常人和患者的CD4+T細(xì)胞的表達(dá)水平；
　　 4.莖環(huán)狀引物實時定量聚合酶鏈反應(yīng)(Stem-loop quantitativereal-time PCR,Stem-loop RT-PCR)檢測miRNA的表達(dá)水平；
　　 5.蛋白質(zhì)印跡(Western blot)檢測蛋白表達(dá)水平。
　　 結(jié)果:
　　 1.芯片結(jié)果顯示:與正常對照組相比,SLE患者CD4+T細(xì)胞中mi

3、R-126,miR-1246,miR-1308,miR-574-5p,miR-638,miR-7顯著上調(diào)(P＜0.01),miR-142-3p,miR-142-5p,miR-197,miR-186,miR-31顯著下調(diào)(P＜0.01)。
　　 2.Stem-loop RT-PCR驗證:與正常對照組相比,SLE患者CD4+T細(xì)胞中miR-126明顯上調(diào)(p＜0.001),miR-142-3p明顯下調(diào)(p=0.001),miR-14

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