Hes1與Akt-Stat3相互整合在缺血后適應(yīng)中的心肌保護(hù)作用.pdf

1、目的:明確Hes1在心肌缺血后適應(yīng)中的保護(hù)作用,探討其內(nèi)源性心肌保護(hù)作用的分子機(jī)制。
　　方法:構(gòu)建 Hes1基因表達(dá)(Ad-Hes1)和干擾(Ad-Hes1-shRNA)重組腺病毒載體, Sprague-Dawley(SD)大鼠心肌細(xì)胞原代培養(yǎng),分別感染Ad-Hes1及Ad-Hes1-shRNA,建立心肌缺血/再灌注(H/R)、缺血后適應(yīng)模型(IPost)體外模型,按實(shí)驗(yàn)分為六組:對(duì)照組(Control)、空載組(Mock)、缺

2、血再灌注組(H/R)、缺血再灌注Hes1表達(dá)組(H/R+Hes1)、缺血后適應(yīng)組(IPost)、缺血后適應(yīng)Hes1干擾組(IPost+Hes1-shRNA)。檢測(cè)各組細(xì)胞活力、凋亡、活性氧及線粒體膜電位,Western blottingting檢測(cè)Hes1、PTEN、Akt/p-Akt、Stat3/p-Stat3、GSK-3β/p-GSK-3β。
　　結(jié)果:心肌細(xì)胞缺氧性損傷時(shí),Hes1表達(dá)顯著增高。Hes1的表達(dá)增高后可顯著提高

3、H/R組細(xì)胞的活力,穩(wěn)定細(xì)胞線粒體膜電位,抑制胞質(zhì)內(nèi)的ROS生成,下調(diào)PTEN的表達(dá),上調(diào)p-Akt、p-GSK-3β、p-Stat3表達(dá),增強(qiáng)心肌的保護(hù)作用;抑制Hes1表達(dá)后,p-Akt、p-GSK-3β、p-Stat3表達(dá)量顯著降低,而IPost對(duì)心肌細(xì)胞的保護(hù)作用也隨之下降。
　　結(jié)論:Hes1作為內(nèi)源性心肌保護(hù)因子,通過激活PI3K/Akt和JAK/Stat3信號(hào)通路,減少細(xì)胞內(nèi)ROS生成,抑制線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔開放,減