低分子肝素對膿毒癥大鼠肺血管內(nèi)皮細(xì)胞功能的影響.pdf

1、目的：本研究通過靜脈注射內(nèi)毒素（LPS）制備膿毒癥大鼠模型，通過測定各組大鼠血清sTM、sE-selectin表達(dá)的變化，以及觀察肺組織病理形態(tài)學(xué)變化和肺組織 VEC凋亡的變化，探討低分子肝素對膿毒癥大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷和凋亡的作用，及其可能的機(jī)制，為膿毒癥的治療提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　(1)將72只SPF級的SD雄性大鼠分為對照組（18只）、膿毒癥組（18只）、脂多糖+肝素(LPS+UFH)組(18只)和脂多糖+低

2、分子肝素（LPS+LMWH）組(18只)，各組再按照觀察時間點(diǎn)平均分為造模后6h、12h和24h各3個亞組，每亞組6只。
　　(2)取造模后各時間點(diǎn)各組大鼠的肺組織制作石蠟切片，并分別進(jìn)行HE和Hoechst33258染色，用以檢測肺血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷和凋亡情況。
　　(3)運(yùn)用免疫組化法檢測各實(shí)驗(yàn)組大鼠肺各時間點(diǎn)血管內(nèi)皮細(xì)胞Bcl-2、Bax的表達(dá)量；
　　(4)用ELISA的方法檢測實(shí)驗(yàn)組大鼠肺各時間點(diǎn)血清中sTM

3、和sE-selectin的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　(1) HE染色結(jié)果顯示膿毒癥導(dǎo)致肺泡腔和小血管內(nèi)紅細(xì)胞聚集，并且而隨著建模時間的延長癥狀加劇。LPS+UFH組和LPS+LMWH組與膿毒癥組相比，肺水腫及紅/白細(xì)胞浸潤的現(xiàn)象顯著改善，其中LPS+LMWH組較LPS+UFH組改善效果明顯。
　　(2) Hoechst33258染色結(jié)果表明，膿毒癥發(fā)生時易導(dǎo)致肺血管內(nèi)皮細(xì)胞呈現(xiàn)不同程度的核固縮，且隨著時間延長，血管內(nèi)皮細(xì)

4、胞的凋亡顯著增加；LPS+UFH組和LPS+LMWH組較膿毒癥組VEC凋亡顯著降低（P<0.01），與對照組相比，LPS+UFH組凋亡細(xì)胞核明顯增多（P<0.01），LPS+LMWH組凋亡細(xì)胞核較LPS+UFH組減少（P<0.05）。
　　(3)免疫組化檢測Bcl-2、Bax結(jié)果表明，LPS+UFH組和LPS+LMWH組血管內(nèi)皮細(xì)胞 Bax蛋白的表達(dá)均明顯低于膿毒癥組（P<0.01）；每組Bcl-2的表達(dá)量無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但Bax/

5、Bcl-2值與膿毒癥組相比顯著降低（P<0.05）；LPS+LMWH組較LPS+UFH組Bax的表達(dá)量顯著下降（P<0.05）。
　　(4)血清sTM和sE-selectin表達(dá)量檢測發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，膿毒癥組在各時間點(diǎn)（6 h、12 h和24 h）血漿sTM濃度均升高（P<0.01）；LPS+UFH組和LPS+LMWH組與膿毒癥組相比，在各時間點(diǎn)血漿 sTM濃度均降低（ P<0.01），但較對照組仍有升高（ P<0.01）；L

6、PS+LMWH組與LPS+UFH組相比略有降低（P<0.05）。從各時間點(diǎn)來看，膿毒癥組在6 h、12 h、24 h sE-selectin表達(dá)量與對照組相比仍然較高（P<0.01），而在24 h時LPS+UFH組和LPS+LMWH組與對照組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；各時間點(diǎn)LPS+UFH組和LPS+LMWH組與膿毒癥組相比sE-selectin表達(dá)量均有下降（P<0.01）。
　　結(jié)論:
　　(1)膿毒癥大鼠血清中sTM和sE-s