膿毒癥患者大網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細胞損傷與Occludin表達的關系.pdf

1、目的：膿毒癥(sepsis)是具有感染證據(jù)的全身炎癥反應綜合征(SIRS)，是一個亟待解決的重要臨床問題，其所致血管內(nèi)皮細胞損傷的機制，主要與內(nèi)毒素(LPS)及炎癥因子作用于血管內(nèi)皮細胞并破壞其屏障功能有關;Occludin蛋白是構成血管內(nèi)皮屏障緊密連接的主要蛋白。研究顯示膿毒癥動物組織血管內(nèi)皮細胞損傷，同時伴隨著Occludin蛋白的定位或表達量的改變。本研究擬檢測緊密連接蛋白Occludin表達，并以電鏡觀察膿毒癥患者大網(wǎng)膜血管內(nèi)皮

2、細胞超微結構，進一步驗證膿毒癥患者大網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細胞的改變，以及與緊密連接蛋白Occludin表達的關系。
　　 方法：符合SIRS診斷標準(2001年國際膿毒癥會議制定)，有腹部確切感染征象，并行腹部手術治療的成年患者納入本研究。根據(jù)是否發(fā)生休克，將納入患者歸類為膿毒癥（sepsis）組（10例）和膿毒癥休克(septic shock)組（10例）。另外隨機選取10例腹部手術非膿毒癥患者作為對照組。收集納入患者手術當天的臨床資

3、料，如降鈣素原(PCT)、急性生理和慢性健康狀況(APACHEⅡ)評分、序貫器官衰竭估計(SOFA)評分，綜合評價膿毒癥患者病情嚴重程度。收集納入患者手術過程中所切除大網(wǎng)膜的動脈血管2cm，分別用4％多聚甲醛溶液和2.5％戊二醛溶液固定1 cm。4％多聚甲醛溶液固定部分采用石蠟包埋切片，使用免疫組織化學技術，檢測Occludin表達量;2.5％戊二醛溶液固定部分送至我院電鏡室，觀察血管內(nèi)皮細胞超微結構及細胞間隙變化，依照《黎鰲燒傷學》血

4、管內(nèi)皮細胞超微結構損傷評分標準[1]，根據(jù)電鏡下內(nèi)皮細胞形態(tài)學變化，進行評分。比較各組患者Occludin表達量的變化，分析膿毒癥患者大網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細胞損傷與Occludin表達的關系。所有數(shù)據(jù)采用SPSS19.0軟件進行統(tǒng)計分析。
　　 結果：⑴膿毒癥組及膿毒癥休克組患者體溫、白細胞計數(shù)均顯著高于對照組(P＜0.001);平均動脈壓顯著低于對照組(P＜0.001)。膿毒癥休克組體溫、白細胞計數(shù)、PCT、APACHEⅡ評分和SO

5、FA評分顯著高于膿毒癥組(P＜0.01);平均動脈壓顯著低于膿毒癥組(P＜0.01)。⑵電鏡觀察大網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細胞，膿毒癥組與膿毒癥休克組患者內(nèi)皮細胞損傷評分顯著高于對照組（P＜0.01）;膿毒癥休克組患者內(nèi)皮細胞損傷評分顯著高于膿毒癥組(P＜0.01);細胞間隙亦有明顯增寬。⑶膿毒癥組及膿毒癥休克組與對照組相比Occludin蛋白表達顯著降低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.001）;膿毒癥組與膿毒癥休克組Occludin蛋白表達無顯著差異