盲腸結扎穿孔膿毒癥大鼠早期肝臟血管內(nèi)皮細胞和肝損傷變化及其相關性研究.pdf

1、目的:本實驗采用大鼠盲腸結扎穿孔致膿毒癥模型,動態(tài)觀察膿毒癥大鼠早期肝臟細胞功能變化與肝臟血管內(nèi)皮細胞損害情況,初步探討兩者是否具有一定的相關性及其可能機理。
　　方法:SD大鼠66只,雌雄不拘,隨機分為3組:(1)正常對照組(n=6),動物于麻醉后,稱重,經(jīng)腹主動脈采血,采用酶聯(lián)免疫分析法檢測血清鳥氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT),血清可溶性E-選擇素(sE-selectin),腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平。大鼠處死,采取少許

2、肝竇組織行電鏡觀察血管內(nèi)皮細胞(VEC)損傷情況,用電子秤稱量肝臟濕重,于80℃烤箱留存48h后,稱量肝臟干重。并計算肝水含量;(2)假手術組(n=30),動物麻醉后行盲腸探查術后關閉腹腔,分別于術后3,6,12,24和48h五時點行與正常對照組相同的操作步驟,每時相點6只大鼠;(3)膿毒癥組(n=30),動物行盲腸結扎穿孔(CLP)術后3,6,12,24和48h五時點行與正常對照組相同的操作步驟,每時相點6只大鼠。
　　結果:1

3、.膿毒癥組在CLP術后3h血清OCT水平即升高(5.9805±0.07u/l),與正常對照組和假手術組相比差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05),且逐步升高,在24小時以后,扔保持較高的水平。2.血清TNF-α水平在CLP術后即明顯高于正常對照組與假手術組(P＜0.01),在24h達峰值(390.94±27.70 pg/ml),隨后有下降趨勢,但仍顯著高于正常對照組和假手術組(P＜0.01)。3.CLP術后3h血清sE-selectin水平開

4、始升高(1.6292±0.01ng/ml),高于正常對照組與假手術組(P＜0.05),且隨著時間的推移,一直保持較高的水平。4.肝臟水含量在CLP3小時以后逐漸增加,但直到傷后12h才出現(xiàn)明顯變化(P＜0.05)。5.電鏡下觀察肝臟血管內(nèi)皮細胞(VEC)在膿毒癥發(fā)展過程中損害逐漸加重,且根據(jù)《黎鰲燒傷學》血管內(nèi)皮超微結構損傷評分標準,內(nèi)皮細胞損傷程度隨時間推移分值逐漸增高。6.所有數(shù)據(jù)以"均數(shù)±標準差"表示,采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件

5、包進行分析,樣本均數(shù)間的比較采用t檢驗;OCT和 sE- selectin,TNF-α和sE-selectin的相關性分析采用Spearman等級相關分析。OCT和sE-selectin;TNF-α和sE-selectin具有顯著正相關,Spearman相關系數(shù)分別0.947和0.781,均為P＜0.01。
　　結論:1.在膿毒癥致急性肝損傷發(fā)病過程中,肝臟巨噬細胞參與了肝損傷的發(fā)生和發(fā)展,TNF-α是誘導sE-selectin上